乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位E39特异性单克隆抗体的制备

被引:6
作者
华荣虹 [1 ]
王斌 [2 ]
陈娜莎 [2 ]
于海 [2 ]
刘天强 [2 ]
马红 [3 ]
刘娣 [1 ]
童光志 [3 ]
机构
[1] 东北林业大学博士后流动站
[2] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
[3] 黑龙江省农业科学院畜牧研究中心博士后工作站
关键词
乙型脑炎病毒; E蛋白; 单克隆抗体; 表位;
D O I
10.16656/j.issn.1673-4696.2008.02.018
中图分类号
R392 [医学免疫学];
学科分类号
100102 ;
摘要
为了制备乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位特异性单克隆抗体,将编码乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位E39的DNA序列进行人工合成,随后插入表达载体pGEX-6p-1的限制性酶切位点BamHⅠ与XhoⅠ之间,构建了表位肽与GST的融合表达质粒。该表位融合蛋白经亲和层析纯化后免疫BALB/c小鼠,按常规方法进行细胞融合。以化学合成的E39表位多肽为抗原,对融合细胞上清进行间接ELISA筛选。结果,筛选出1株分泌E39表位特异性抗体的杂交瘤细胞株,该杂交瘤细胞分泌抗体能力稳定。经鉴定,该单克隆抗体亚型为IgG2b,轻链类型为κ链。结果表明,用表位融合蛋白为抗原可以制备表位特异性单克隆抗体。
引用
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