谷精草提取物对6-OHDA所致PC12细胞及斑马鱼神经损伤模型的保护作用

被引:11
作者
王美微 [1 ]
张在军 [1 ]
林志秀 [2 ]
李铭源 [1 ]
机构
[1] 澳门大学中华医药研究院
[2] 香港中文大学中医学院
关键词
谷精草提取物; PC12细胞; 斑马鱼; 6-羟基多巴胺(6-OHDA); 一氧化氮; 诱导型一氧化氮合酶(iNOS);
D O I
10.19378/j.issn.1003-9783.2010.04.004
中图分类号
R285.5 [中药实验药理];
学科分类号
100806 [中药药理学];
摘要
目的探讨谷精草乙醇提取物(Eriocaulon buergerianum extract,EBE)对6-羟基多巴胺(6-hydroxy-dopamine,6-OHDA)在PC12细胞和斑马鱼上引起的神经损伤的保护作用及其机制。方法采用4-甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)和乳酸脱氢酶释放法(LDH法)检测PC12细胞的活力;Hoechst 33324荧光染色观察细胞核形态的改变分析细胞凋亡;DAF-FM diacetate荧光染色检测细胞内一氧化氮(NO)的含量;采用免疫印迹法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS蛋白)的表达水平。免疫染色方法观察斑马鱼脑部多巴胺神经元的变化。结果 EBE能够剂量依赖性的提高6-OHDA损伤的PC12细胞的存活率,减少6-OHDA引起的PC12细胞凋亡。免疫染色的结果表明EBE可以抑制6-OHDA在斑马鱼上所引起的多巴胺神经元的减少。作用机理研究证明EBE能够降低6-OHDA刺激的PC12细胞内NO含量增加。免疫印记杂交的结果显示EBE能够降低iNOS的表达。结论 EBE对6-OHDA诱导的PC12细胞损伤具有保护作用,能减少6-OHDA引起的细胞凋亡,并且可以抑制6-OHDA在斑马鱼上引起的多巴胺神经元减少,其作用机制可能与降低NO的产生和iNOS的表达量有关。
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