p38丝裂原活化蛋白激酶介导抵抗素调节高糖刺激下人肾小球系膜细胞增殖的作用

目的观察巨噬细胞因子抵抗素过度表达对高糖刺激作用下人肾小球系膜细胞p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路的影响,探讨抵抗素调控肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质积聚的作用机制。方法通过转染携带野生型抵抗素基因的腺病毒载体（Ad-resistin）构建过度表达抵抗素的人巨噬细胞模型,并与高糖刺激后的人肾小球系膜细胞共培养。3H-氚标胸腺嘧啶掺入法检测肾小球系膜细胞增殖。免疫细胞化学法检测系膜细胞激活蛋白1（AP-1）的表达。免疫荧光检测细胞外基质层粘连蛋白（LN）的表达。Western印迹检测系膜细胞内p38MAPK、转化生长因子（TGF）β1的表达并测定Smad2的磷酸化水平。结果Ad-resistin转染后,人巨噬细胞抵抗素mRNA水平及蛋白表达均显著升高（P<0.01）。与对照组比较,与过度表达抵抗素的人巨噬细胞共培养后,人肾小球系膜细胞p38MAPK、TGF-β1的蛋白表达显著增强;细胞内Smad2的磷酸化水平显著升高（P<0.05）;肾小球系膜细胞出现明显的增殖（P<0.01）;细胞外基质的合成增多（P<0.05）。结论巨噬细胞因子抵抗素的过度表达可能通过p38MAPK信号通路,促进高糖刺激作用下肾小球系膜细胞的增殖及细胞外基质的异常积聚。