“分子搭桥术”基因治疗闭塞性血管病的实验研究

目的 应用血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）基因治疗实验性闭塞性外周血管病。方法构建重组ＶＥＧＦ１６５基因的真核表达载体，其上游含巨细胞病毒（ＣＭＶ）启动子；通过基因缝线，向一侧髂外动脉结扎引起血管闭塞症大鼠的肌肉内转移ＶＥＧＦ基因（２００μｇ／只）；应用逆转录－聚合酶链反应，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ以及免疫组织化学方法观察ＶＥＧＦ基因的表达，并通过血管造影技术观察ＶＥＧＦ基因导入大鼠体内的生物效应。结果转ｐｃＤＮＡ３／ＶＥＧＦ基因７天后，肌肉组织内ＶＥＧＦｍＲＮＡ及其表达产物明显高于对照组单纯转ｐｃＤＮＡ３组；血管造影可见大量新生血管和侧支循环的形成，在１４天和３０天时更明显，转ＶＥＧＦ基因可以明显促进闭塞性下肢血流的恢复和改善组织坏死的程度。结论肌肉内转移ＶＥＧＦ基因，通过促进血管新生和侧支循环建立，促进血流恢复，为闭塞性血管病的治疗，提供一种新的可能性──分子搭桥术。