南瓜未受精胚珠的离体培养及植株再生

以南瓜(Cucurbita moschata)品种试验1号为材料,以未受精胚珠为外植体,研究了激素种类、外植体发育时期、高温预处理时间和AgNO3浓度对胚状体诱导的影响。结果表明,2,4-D、NAA和6-BA组合有利于胚状体的形成,出胚效果最好的培养基为MS+1.0mg·L-12,4-D+0.25mg·L-1NAA+0.5mg·L–16-BA,出胚率达31.1%;雌花开放当天的胚珠出胚率最高(26.7%),且愈伤组织形成频率低(<5%);外植体在黑暗、高温(35°C)条件下处理5天有利于胚状体的形成,出胚率为32.2%。培养基中添加AgNO3对胚状体形成的抑制作用明显。胚状体转移至成苗培养基后可形成正常小苗,出苗率最高可达64.3%,植株再生过程经历了典型的胚胎发育途径。细胞学观察结果表明,胚状体极有可能起源于胚囊珠孔端的细胞,即卵细胞或助细胞。