宫颈癌及癌前病变HPV-16存在状态检测的研究

目的:为建立理想的HPV存在状态检测方法,了解宫颈癌及癌前病变HPV-16DNA的整合状况,初步探讨HPV-16DNA整合在宫颈癌发生发展中的作用及HPV-16整合状态检测可能具有的临床应用价值。方法:采用多重实时PCR同管定量检测HPV-16E2和E6基因,根据E2/E6比值来判定HPV-16DNA的存在状态;并对HPV-16阳性的51例宫颈鳞癌和49例宫颈上皮内瘤样病变石蜡标本进行检测。结果:1)HPV-16E2、E6标准曲线相关系数均为1.00,扩增效率均在95%以上。2)确定0.81作为多重实时PCR区分游离型和混合型HPV-16的界值。3)CINⅠ中HPV-16大多以游离方式存在,但仍有整合的发生(42.9%);CINⅡ和CINⅢ中HPV-16以混合型为主;浸润癌中以整合型HPV-16为主。4)HPV-16整合发生率与不同程度的宫颈病变有关,并且随着宫颈病变级别的升高HPV-16整合发生率呈上升趋势。5)Ⅱ+Ⅲ期宫颈癌中整合型HPV-16所占比例显著高于Ⅰ期宫颈癌。结论:1)多重实时定量PCR是一种敏感性高、简便快速的HPV-16病毒存在状态的检测方法。2)HPV-16整合是宫颈癌变的早期事件,与宫颈癌前病变的进展有关。3)宫颈癌中整合型HPV-16的发生可能具有预后价值。