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LipoxinA4受体样蛋白基因转染增强LipoxinA4拮抗结缔组织生长因子诱导的人肺成纤维细胞增殖
被引：10
作者：
陆超
陈吉庆
吴升华
吴元俊
赵非
潘晓勤
费莉
郭梅
黄松明
郭锡熔
陈荣华
机构：
[1] 南京医科大学第一附属医院儿科,南京医科大学第一附属医院儿科,南京医科大学第一附属医院儿科,南京医科大学第一附属医院儿科,南京市儿童医院肾科,南京医科大学儿科研究所,南京医科大学儿科研究所,南京医科大学儿科研究所,南京医科大学儿科研究所,南京医科大学儿科研究所,南京医科大学儿科研究所,,,
来源：
关键词：
膜蛋白质类;
即早蛋白质类;
胞间信号肽类和蛋白质类;
成纤维细胞;
细胞分裂;
D O I：
暂无
中图分类号：
R563.9 [其他];
学科分类号：
100201 [内科学];
摘要：
目的克隆LipoxinA4受体样蛋白(LRLP)基因,并转染人肺成纤维细胞(HLF)。观察其增强LipoxinA4拮抗结缔组织生长因子(CTGF)诱导的细胞增殖作用。方法构建LRLP与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因的真核表达载体pEGFP/LRLP,并转染HLF,用G418筛选稳定表达融合基因的细胞克隆株HLF/LRLP。用10nmol/LLipoxinA4预处理HLF和HLF/LRLP细胞30min后,加入1μg/mlCTGF诱导细胞增殖。MTT法检测细胞增殖抑制率。流式细胞术检测细胞周期。Western blot检测细胞周期蛋白D1的蛋白表达量。凝胶迁移率改变试验检测信号转导子和转录激活子3(STAT3)的DNA结合力。结果(1)成功建立稳定表达LRLP和GFP融合基因的HLF/LRLP细胞株。(2)1μg/mlCTGF刺激24h,可显著诱导HLF增殖。LipoxinA4预处理对其有抑制作用,10nmol/LLipoxinA4对HLF/LRLP的细胞增殖抑制率显著高于对HLF细胞的增殖抑制率(P<0.05)。(3)与未转染和空载体转染的HLF相比,10nmol/LLipoxinA4诱导更多的HLF/LRLP细胞生长停滞在G0/G1期(P<0.05)。(4)10nmol/LLipoxinA4拮抗CTGF诱导的细胞周期蛋白D1表达上调,并且对HLF/LRLP细胞的拮抗作用强于对HLF细胞(P<0.05)。(5)10nmol/LLipoxinA4拮抗CTGF诱导的STAT3DNA结合力上调,并且对HLF/LRLP细胞的拮抗作用强于对HLF细胞(P<0.05)。结论LRLP基因
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