蚕豆叶片下表皮ABA结合蛋白的分离纯化

被引：8

作者：

吴忠义

张大鹏

贾文锁

机构：

[1] 中国农业大学植物科技学院!北京,中国农业大学植物科技学院!北京,中国农业大学植物科技学院!北京

来源：

植物学报 | 1999年 / 08期

关键词：

ABA; 结合蛋白; 亲和层析; 蛋白纯化;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q946 [植物生物化学];

学科分类号：

071001 ;

摘要：

将ＡＢＡ通过一个１０碳原子的臂高效率地（６～８ｍｍｏｌ／Ｌ凝胶）偶联到琼脂糖凝胶４Ｂ上，制成亲和层析柱，用以纯化蚕豆（ＶｉｃｉａｆａｂａＬ．）叶片下表皮ＡＢＡ结合蛋白（ＡＢＡ＿ＢＰ）。样品上柱后，通过ＮａＣｌ盐梯度洗脱去掉大部分非特异结合的杂蛋白后，用１ｍｍｏｌ／ＬＡＢＡ亲和洗脱竞争亲和柱中的ＡＢＡ＿ＢＰ，纯化到一种ＡＢＡ特异结合蛋白，纯化了１１２倍。纯化蛋白与ＡＢＡ最大结合为５８．３３ｎｍｏｌ／ｇｐｒｏｔｅｉｎ，Ｋｄ值为２１ｎｍｏｌ／Ｌ，亚基分子量为４４．２ｋＤ，纯度约为９０％。纯化的ＡＢＡ结合蛋白具有典型的蛋白质紫外吸收光谱，在２８０ｎｍ处有明显吸收峰

引用

页码：842 / 845

页数：4

共 9 条

[1]

Immobilization of ligands with organic sulfonyl chlorides. Nilsson K,Mosbach K. Methods in Enzymology . 1984

[2]

Purification and properties of an auxin_binding protein from maize shoot membrane. Shimomura S,Sotobayashi T,Futai M,Fukui T. Journal of Biochemistry . 1986

[3]

Cytosolic high affinity ABA_binding protein from wheat shoots. Veliv S N. Bitkhimiya (Moscow) . 1991

[4]

Specific binding ofzeatin bya proteinfraction ofbarleyleavesandpurification of cytokinin_binding proteins. Romanov GA,Taran VYa,Khvoika L,Kulaeva ON. Plant Physiology . 1986

[5]

Active_staining cleavage of structural proteinsduringthe assemblyofthe head ofbacteriophage T4. Lamelli U K. Nature . 1970

[6]

The ethylene signaltransduction pathwayin Arabidopsis. KieberJJ. Journal of Experimental Botany . 1997

[7]

Amodification oflowry procedureto simplify protein determination inmembrane andlipoproteinsamples. Markwell AK,HassSM,Bieber LL,Tolbert NE. Analytical Biochemistry . 1978

[8]

Abscisic acid signaling through cyclic ADP-ribose in plants. Wu Y,Kuzma J,Marechal E,et al. Science . 1997

[9]

High affinity binding sites for abscisic acid on the plasmalemma of Vicia faba guard cells. Hornberg C,Weiler EW. Nature . 1984

← 1 →