目的:建立万古霉素血药浓度的快速高效液相色谱法测定方法。方法:以去甲万古霉素为内标,血浆样品经硫酸锌沉淀,采用Thermo-C18柱(250mm×4.6mm,5μm)色谱分析柱;以甲醇-pH3.2磷酸二氢钾缓冲液(20:80)为流动相;流速为1.0mL·min-1;检测波长为230nm;柱温为25℃;进样量为10μL。结果:万古霉素最低检测浓度为80ng·mL-1;血浆样品浓度在5.0~80.00mg·L-1范围内呈良好的线性关系,r=0.9947,n=5;相对回收率为在98.67%~100.4%;日内RSD与日间RSD均在1.6%~3.4%(n=5)。结论:该方法采血量少,简便快速、灵敏度高、重复性好,适用于临床常规血药浓度监测及药动学研究。