化学突变具有底物结合部位的单克隆抗体制备含硒抗体酶

被引:3
作者
丁兰,朱振齐,罗贵民,高贵,孙启安,刘仔,杨同书,沈家
机构
[1] 吉林大学酶工程国家重点实验室,吉林大学分子光谱和结构开放实验室,白求恩医科大学地方病研究所,长春农牧大学军事兽医研究所
关键词
抗体酶;单克隆抗体;谷胱甘肽过氧化物酶;化学突变:催化抗体;
D O I
暂无
中图分类号
Q553.03 [];
学科分类号
071010 ; 081704 ;
摘要
开发了一种制备抗体酶的新方法。用二硝基氯苯(DNCB)专一地与谷胱甘肽(GSH)的巯基反应,合成出半抗原GSH-S-DNP。用戊二醛将半抗原偶联到牛血清白蛋白(BSA)上,制成全抗原。再用标准的单抗制备法获得具有GSH结合部位的单抗(4A4IgG)。用苯甲基磺酞氟(PMSF)和H2Se相继处理该单抗,则将单拉结合部位上的丝氨酸(Ser)突变成硒代半胱氨酸(SeCys,因而在单抗结合部位上引入了谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的催化基团。突变后的单抗具有GPX活性,其活力已达到天然GPX的数量级水平。动力学行为也与天然GPX类似。这种新的含硒抗体酶有优于GPX的一些特点。
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