在石蜡切片中进行微切割-PCR-银染的方法

目的　探索在石蜡切片中应用微切割 - PCR-银染技术 ,检测大肠癌的微卫星不稳定性和杂合性缺失。方法　用微切割技术在 2 8例石蜡切片中提取淋巴细胞和间质细胞、癌旁粘膜腺管、不典型增生腺管、腺瘤腺管和腺癌细胞 ,每例至少包含 3种类型细胞 ,经蛋白酶 K消化后 ,直接用于 PCR扩增 ,产物进行8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 -银染。共进行了 TGF-βR (A) 1 0 、h MSH2 (A) 2 6 - Bat2 6 ,h MSH3(A) 8,h MSH6(C) 84个微卫星位点的检测。结果　 h MSH3(A) 8和 h MSH6 (C) 8位点在 2 8例标本全部扩增出目的片段 ,而TGF-βR (A) 1 0 和 h MSH2 (A) 2 6 位点则分别有 2 3例、2 2例扩增出目的片段 ,且 h MSH2 (A) 2 6 位点有 5例癌细胞呈阳性 ,其中 1例同时有腺瘤细胞阳性。结论　微切割 - PCR-银染技术应用于石蜡切片 ,可获得较满意的结果 ,可用于检测微卫星不稳定性等研究