流式微球分析技术检测人心肌钙蛋白T方法的建立

被引:4
作者
黄山 [1 ]
郑金鼎 [2 ]
许健 [1 ]
令狐颖 [1 ]
刘志琴 [2 ]
袁军 [2 ]
机构
[1] 贵州省临床检验中心
[2] 贵州省人民医院
关键词
心肌钙蛋白T; 流式微球分析技术; 方法学;
D O I
暂无
中图分类号
R542.22 [];
学科分类号
摘要
目的建立流式微球分析技术(cytoometric bead assay,CBA)检测人肌钙蛋白T(cTnT)方法。方法用鼠抗人的cTnT的单克隆抗体包被在已激活的羧基化聚苯乙烯微球上,然后再用包被好的微球与检测标本进行抗原抗体免疫反应,并加入羊抗人cTnT的多克隆抗体和异硫氰酸荧光素(FITC)标记的驴抗羊的IgG,室温避光免疫反应一定时间后洗涤一次,上流式细胞仪检测FITC的荧光强度,以此测定标本中cTnT含量。结果通过正交试验,在100μl反应体系中,微球含量大约为1.25×106,选择10μg的鼠抗人cTnT单克隆抗体为最佳加入量,加入标本和抗体后,选择避光反应时间为120 min,洗涤选择一次,选择8μg/ml羊抗人cTnT多克隆抗体和20μg/ml FITC标记驴抗羊IgG为最佳工作浓度;方法检测灵敏度为16.0 pg/mL,线性范围是16-5 000 pg/mL,批内重复性变异系数为5.2-11.3%,回收率是94.7-111.5%,高浓度的胆红素、胆固醇和甘油三脂无明显干扰,与Roche Elecsys的电化学发光法有较好的相关性。结论自建CBA检测cTnT技术性能较好,可在临床工作中推广使用。
引用
收藏
页码:659 / 661
页数:3
相关论文
共 3 条
[1]   克伦特罗流式微球竞争性免疫检测技术及试剂 [J].
高海霞 ;
邹明强 ;
王岭 ;
李锦丰 ;
蒋继志 ;
崔霞 ;
胡秀丽 ;
陈立本 .
化学试剂, 2008, (07) :509-511
[2]   心肌标志物的实验研究及临床应用 [J].
钱江龙 .
西南国防医药, 2005, (01) :1-3
[3]  
临床检验方法学评价[M]. 人民卫生出版社 , 张秀明, 2008