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利用转座子Tn917构建杀虫Bt工程菌
被引：7
作者：
余健秀，庞义，李建华，余榕捷，汤慕瑾
机构：
[1] 中山大学昆虫学研究所／生物防治国家重点实验室
来源：
基金：
广东省自然科学基金;
关键词：
苏云金杆菌；杀虫晶体蛋白；转座子Tn917;
D O I：
暂无
中图分类号：
Q789 [基因工程的应用];
学科分类号：
071007 ;
0836 ;
090102 ;
摘要：
利用链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｕｓｆａｅｃａｌｉｓ）的转座子Ｔｎ９１７衍生载体ｐＴＶ１Ｔｓ将苏云金杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ，Ｂｔ）的２个杀虫晶体蛋白（ＩＣＰｓ）基因整合进Ｂｔ染色体上，转座频率达５９×１０－５．将对双翅目昆虫有毒效的ＩＣＰｓ基因ｃｒｙ１１Ａ和广谱溶细胞且对蚊子等有毒效的ｃｙｔ１Ａ基因分别克隆到ｐＴＶ１Ｔｓ上，用高压电激法转入对鳞翅目昆虫有毒效的库斯塔克亚种（Ｂｔｓｕｂｓｐｋｕｒｓｔａｋｉ）ＨＤ １菌株，分别筛选到在染色体基因组上整合进这２个基因的突变株ＨＴ２６和ＨＴ４５，整合基因均能在这２株工程菌中获得表达并形成正常的伴孢晶体．生物测定结果显示，表达的Ｃｒｙ１１Ａ和Ｃｙｔ１Ａ晶体蛋白有很高的杀虫活性，对库蚊三龄幼虫的ＬＣ５０分别为８３ｎｇ／ｍＬ和６４ｎｇ／ｍＬ，同时Ｃｙｔ１Ａ晶体蛋白对培养的昆虫细胞有较强的溶解作用．其结果为创造新型基因工程苏云金杆菌杀虫剂提供了新的重要途径
引用
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