狂犬病诊断基因芯片的建立和检测应用的初步研究

被引：10

作者：

张伟 ^{[1
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吴时友 ^{[2
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尹燕博 ^{[2
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牛钟相 ^{[3
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张秀美 ^{[1
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机构：

[1] 山东省农业科学院

[2] 山东澳兰生物工程研究院

[3] 山东农业大学动物科技学院

来源：

中国预防兽医学报 | 2008年 / 02期

关键词：

狂犬病病毒; 基因芯片; 间接ELISA; (RT)PCR;

D O I：

暂无

中图分类号：

S854.43 [];

学科分类号：

摘要：

根据已发表的狂犬病病毒(RV)的序列,设计合成能扩增高度保守核(N)蛋白片断的一对引物。通过生物素标记PCR技术,将核(N)蛋白基因片断作为探针点在硝酸素纤维膜上,制作成疾病诊断基因芯片。取160份可疑动物的血液,提取核酸作模板进行PCR扩增,将其产物与诊断基因芯片进行特异性逆向点杂交检测;并用蔗糖密度梯度离心和凝胶层析纯化狂犬病病毒作抗原,建立检测RV抗体的间接ELISA。把以上两种方法应用于临床,结果基因芯片的检测率比ELISA方法和(RT)PCR要高15%左右,表明建立的狂犬病诊断基因芯片具有更高的灵敏度和特异性。

引用

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