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- [1] 分子克隆实验指南.[M].(美)J.萨姆布鲁克(JosephSambrook);(美)D.W.拉塞尔(DavidW.Russell)著;黄培堂等译;.科学出版社.2002,
- [3] 稳定携带新城疫病毒DNA疫苗减毒沙门氏菌的构建及其免疫原性[J]. 病毒学报, 2008, (01) : 41 - 46潘志明黄金林程宁宁崔一晨游猛唐丽华张晓明焦新安刘秀梵
新城疫病毒F基因在大肠杆菌中的高效表达及其免疫原性分析
被引：2
作者：
游猛
潘志明
耿士忠
文科
陈俊华
张磊
方强
蔡雯婷
焦新安
机构：
[1] 扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室
来源：
关键词：
新城疫病毒;
融合蛋白;
原核表达;
免疫原性;
D O I：
10.16372/j.issn.1004-6364.2009.20.028
中图分类号：
S852.5 [血清学];
学科分类号：
摘要：
应用PCR技术,以含有新城疫病毒F48E8株全长融合蛋白(F)基因的真核表达质粒pVAX1-F为模板,扩增出594bp大小的F基因的部分片段。经克隆筛选和测序后,构建成重组原核表达质粒pGEX-6P-1-F。重组质粒转化表达菌BL21,获得重组菌BL21(pGEX-6P-1-F)。经IPTG诱导和SDS-PAGE分析表明,F基因在原核表达体系中获得高效表达,表达量占菌体总蛋白的23%。Western blotting结果显示,在相对分子质量46ku位置有特异性条带。动物实验结果表明,F蛋白免疫鸡产生的针对新城疫病毒F蛋白的血清抗体效价显著高于空白对照组(P<0.05),说明原核表达系统表达的F蛋白具有良好的免疫原性。
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