农杆菌介导南瓜遗传转化体系的建立

被引:7
作者
付洪冰 [1 ]
崔崇士 [1 ]
赵曦 [2 ]
刘琦 [2 ]
机构
[1] 东北农业大学园艺学院
[2] 黑龙江省农业科学院生物技术研究所
关键词
根癌农杆菌; 南瓜; 遗传转化; PCR; Southernblot;
D O I
暂无
中图分类号
S642.1 [南瓜];
学科分类号
090202 ;
摘要
以南瓜金辉一号(Cucurbita moschata' Jinhui1')为实验材料,利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化南瓜子叶节,研究了预培养时间、侵染时间、乙酰丁香酮(AS)浓度和共培养时间,抗生素羧苄青霉素(Carb)、头孢霉素(Cef)以及筛选剂卡那霉素(Kan)等因素对离体不定芽的影响,建立了南瓜最适遗传转化体系。结果表明:外植体预培养0天,侵染时间30分钟,AS浓度为100mg·L-1,共培养5天可获得最高遗传转化效率;最适除菌剂为Cef,其最适浓度为500mg·L-1;最适Kan筛选浓度为100mg·L-1;在MS培养基上培养抗性芽生根,经PCR和Southern blot检测,证明为转基因植株。
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页数:7
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