恶性疟原虫(海南株)cDNA表达文库的构建及初步鉴定

被引:11
作者
王燕妮
肖谷田
毕惠祥
李明
金丽娟
李英杰
谢毅
机构
[1] 遵义医学院免疫学教研室!遵义,复旦大学遗传工程国家重点实验室!上海,第一军医大学疟疾免疫研究室!广州,第一军医大学疟疾免疫研究室!广州,复旦大学遗传工程国家重点实验室!上海,第一军医大学疟疾免疫研究室!广州,复旦大学遗传工程国家重
关键词
恶性疟原虫; 红内期; cDNA表达文库;
D O I
暂无
中图分类号
R382.31 [];
学科分类号
100103 ;
摘要
目的 :构建恶性疟原虫 c DNA表达文库。方法 :采用“一步法”提取红内期恶性疟原虫12 2 4 μg RNA,经 Oligo( d T)纤维素柱纯化得到 35.84 μg poly ( A) +m RNA。取 10 μg m RNA反转录得到 1.75μg平端双链 c DNA,与含 Eco RI,Not I,Sal I酶切位点的衔接头连接后 ,经分级分离柱纯化回收到 2 0 0 ng大小主要在 50 0 bp- 7kb左右的 c DNA片段。取 50 ng c DNA与λgt11噬菌体臂连接后体外包装 ,完成建库。并采用 PCR方法初步鉴定该文库。结果 :已构建一个含 10 6个重组子的 c DNA表达文库。结论 :文库容量及插入 c DNA片段的大小适合于进一步研究。
引用
收藏
页码:24 / 28
页数:5
相关论文
共 1 条
[1]  
分子克隆实验指南.[M].[美]萨姆布鲁克(Sambrook;J·)等 著;金冬雁等 译.科学出版社.1992,