将抗体库所获抗-HBs Fab转换为全长人IgG

目的　将大肠杆菌表达的抗乙肝表面抗原(HBs)人Fab转换为真核表达的全长人IgG1。方法　用重叠PCR法将人工合成的人Vκ前导序列拼接到抗HBs的VH和Vκ上,构建人IgG1真核表达载体,转染真核细胞,通过ELISA、RTPCR、免疫印迹检测抗HBs人IgG的表达。结果　用轻链和重链同时表达的单一载体在CHO细胞中获得了抗HBs人IgG的表达。结论　通过噬菌体抗体库所获Fab段可经拼接人Vκ前导序列在真核获得功能性表达。