表达幽门螺杆菌hpaA重组减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建和鉴定

被引：5

作者：

朱森林

陈旻湖

廖文俊

陈洁

胡品津

机构：

[1] 中山医科大学附属第一医院消化内科!广州

来源：

中国免疫学杂志 | 2001年 / 03期

基金：

广东省科技计划; 广东省自然科学基金;

关键词：

幽门螺杆菌; hpaA基因; 鼠伤寒沙门氏菌; 疫苗; 重组;

D O I：

暂无

中图分类号：

R378 [病原细菌];

学科分类号：

100103 ; 100705 ;

摘要：

目的 :构建表达幽门螺杆菌 (H pylori)hpaA的重组减毒鼠伤寒沙门氏疫苗菌。方法 :用基因工程的方法将hpaA基因克隆入原核表达质粒pTrc99A ,并进行了基因测序。重组质粒经鉴定后再导入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL32 6 1,提取重组疫苗菌质粒 ,PCR和酶切鉴定 ,筛选阳性克隆。用SDS PAGE电泳和Westernblot进行HpaA表达和鉴定。结果 :经PCR和酶切证实 ,构建了含hpaA的重组原核表达质粒pTrc99A hpaA ,并将后者成功转化了减毒鼠伤寒沙门氏菌。HpaA能在疫苗菌中以二聚体形式表达 ,HpaA量约占全菌体蛋白量的 17% ,Westernblot证实其有免疫原性。结论 :构建了表达H pylorihpaA的重组减毒鼠伤寒沙门氏疫苗菌 ,为探索制备H pylori口服活疫苗奠定了基础

引用

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