邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）诱发小鼠胆汁淤积和肝损伤的作用机制

目的 探讨邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）诱发小鼠胆汁淤积和肝损伤机制研究。方法 体内实验：将成年雌性ICR小鼠随机分为对照组（玉米油）、DEHP组（200 mg·kg-1·d-1），共灌胃4周，建立胆汁淤积模型。收集所有小鼠血液与肝组织，生化仪检测血清、肝脏总胆汁酸（TBA）水平，酶标仪检测ALP、GGT;HE染色观察肝组织病理变化；实时定量PCR检测肝脏炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平；液相色谱-三重四级杆质谱仪（LC-MS/MS）检测小鼠肝脏胆汁酸谱。体外实验：培养小鼠肝细胞AML-12，使用DEHP(250μmol/L)以及去氧胆酸（DCA）(125μmol/L)和鹅去氧胆酸（CDCA）(125μmol/L)处理细胞24 h，实时定量PCR检测细胞炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA水平。计量资料两组间比较采用成组t检验，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 体内实验显示：与对照组相比，DEHP组小鼠肝体比，血清TBA、ALP、GGT及肝脏TBA均显著升高（t值分别为-4.396、-5.109、-8.504、-3.792和-7.974,P值均<0.05）。与对照组相比，肝脏胆汁酸谱中胆酸（CA）、CDCA、牛磺鹅去氧胆酸（TCDCA）、DCA及熊去氧胆酸（UDCA）均显著升高（t值分别为-2.802、-3.177、-2.633、-2.874和-2.311,P值均<0.05）。DEHP组小鼠肝脏HE染色显示为汇管区扩大、胆管变形、胆管周围伴有炎性细胞浸润，且肝脏炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA水平均显著升高（t值分别为-2.539、-2.823和-4.636,P值均<0.05）。体外实验显示：0～1 000μmol/L DEHP处理后肝细胞活力实际数值相差不超过15%，分别使用125、250以及500μmol/L的DEHP刺激后，肝细胞的炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA水平均明显升高（P值均<0.05）。与单独使用DEHP刺激相比，CDCA联合DEHP刺激上调了细胞炎症因子IL-1β mRNA水平（P<0.01）;DCA与DEHP联合刺激可显著增加细胞炎症因子IL-1β和IL-6的mRNA水平（P值均<0.01）。结论 DEHP暴露导致小鼠胆汁淤积肝病的发生并诱发肝脏炎症，这可能与其促进有毒胆汁酸的产生进而加剧炎性因子分泌有关。