EVOLUTION OF ENDOPEPTIDASES, 10 - SPECIFICITY OF LOW MOLECULAR WEIGHT PROTEASE FROM ASTACUS LEPTODACTYLUS ESCH

Zur Aufklärung der Spaltungsspezifität der niedermolekularen Protease aus Astacus leptodactylus (Mol.-Gew. 11000) wurde ein bereits durch wiederholte Gelfiltration und Austauscher-Chromatographie gereinigtes Enzympräparat durch Disk-Elektrophorese hoch gereinigt. Es war frei von jeglicher hydrolytischer Fremdaktivität.Zahlreiche Di-, Tri- und Pentapeptide wurden von der niedermolekularen Protease nicht hydrolysiert, ebenso nicht die synthetischen Substrate Na-Ben-zoyl-arginin-äthylester, N-Acetyl-tryosin-äthylester und N-Acetyl-phenylalanin-naphthylester, obwohl in Polypeptid-Substraten auch basische und aromatische Peptidbindungen rasch gespalten wurden.Die A-Kette des oxydierten Insulins wird nicht hydrolysiert. An der B-Kette und am Synacthen ergaben sich jeweils 3 Spaltstellen. Am Angiotensin fanden wir eine Spaltstelle. Dies deutet auf eine recht begrenzte Spaltungsspezifität hin. Es zeigte sich, daß 4 von 5 in den Sequenzen insgesamt vorhandenen Prolin-Resten zu einer Spaltung nach dem Schema [formula omitted]- Pro führen. Dieeinzige Ausnahme hiervon bildete ein carboxyl-endständiger Prolin-Rest.Drei Spaltstellen ließen sich nicht in das vorgeschlagene Schema einordnen. Die ähnlichkeit der ermittelten Spaltungsspezifität mit der der Collagenase aus Clostridium histolyticum wird diskutiert. © 1969, Walter de Gruyter. Alle Rechte vorbehalten.