蒙古口蘑多糖提取、分离及纯化技术的研究

蒙古口蘑作为一种名贵且营养丰富的食用菌,其多糖、蛋白质等物质含量丰富,对人体有很好的保健作用,但目前对子实体中生物活性物质的的研究还少有报导。多糖作为蒙古口蘑中含量最为丰富的生物活性物质之一,具有十分重要的研究价值。本论文通过对蒙古口蘑多糖的提取、分离及纯化方法进行较为系统的研究,得到纯度较高的蒙古口蘑多糖精粉,为大规模的工业化生产提供了一定的理论依据,同时也为蒙古口蘑的高附加值开发利用奠定了科学基础。 本论文主要研究成果如下: 1、对提取前的蒙古口蘑进行了超临界CO2脱脂处理的研究,通过正交试验确定了最佳的脱脂条件:萃取压力30MP、萃取温度35℃、萃取时间160min、CO2流量20L/h。通过超临界CO2萃取脱脂,除了可将脂类物质彻底脱除,还具有一定的脱色和脱除异味作用,对多糖的提取起到了良好的辅助作用。 2、通过单因素和正交试验,确定了蒙古口蘑多糖的提取条件。热水浸提的最佳工艺条件为:料液比1:40、浸提温度90℃、浸提时间3h,原料粒度0.147mm;微波提取的最佳工艺条件为:微波功率300W、微波处理时间4min、料液比1:30、原料粒度0.147mm。在上述两种最佳提取条件下的多糖得率分别为34.65%和31.05%。通过对比,热水浸提的多糖得率要高于微波浸提,但是相对费时、耗能。 3、通过对乙醇加入量、醇沉时间的研究,确定了蒙古口蘑多糖提取液的最佳醇沉条件:3倍量95%的乙醇处理6h。经过醇沉、干燥,每100g蒙古口蘑可以得到21.34g粗多糖。 4、对蒙古口蘑多糖脱蛋白进行了Sevag法、三氯乙酸法和离子交换层析法三种方法的研究,确定了它们各自最佳的脱蛋白条件,三种方法的蛋白脱除率分别为52.05%、41.29%和56.25%,多糖损失率分别为14.68%、24.67%和14.91%。经过比较,确定使用离子交换层析作为脱蛋白方法。 5、使用Sephadex G-100和Sephadex G-75两种凝胶层析对脱蛋白后的多糖进行了进一步的分离、纯化研究,确定了蒙古口蘑多糖至少含有16.77%的大分子组分和63.92%的小分子组分;小分子组分又由三种不同组分组成,它们占多糖总量的比例分别为28.35%、7.87%、23.96%。通过不同条件下的收集和冷冻干燥,可以得到纯度较高的各组分多糖精粉。