地黄寡糖的制备工艺及其药理活性研究

地黄是玄参科植物地黄(Rehmannia glutinosa Libosch．)的块根，为常用中药材，已报道的成分达一百余种，其中地黄寡糖为主要成分。现代研究证明，地黄寡糖具有增强免疫、促进造血、降血糖和抗肿瘤等活性，这些研究工作所用“地黄寡糖”为混合物，其中含四糖60％，三糖20％或30％，其余成分不明确。究竟哪些是地黄寡糖中的有效成分?地黄寡糖在鲜地黄中以水苏糖为主，在熟地黄中以甘露三糖为主，水苏糖降解为甘露三糖是否与地黄功效的变化有直接关系?这些问题目前尚不明确。本课题研究了水苏糖和甘露三糖的制备工艺，并进行了其补血、降血糖和抑癌活性研究，结果如下： 1．利用鲜地黄，经匀浆、醇提、乙酸乙酯萃取、大孔吸附树脂柱层析、活性炭柱层析、凝胶柱层析等工序，成功制备了水苏糖单体，并优化了其制备工艺。然后，对水苏糖进行酸水解和酶水解制备了甘露三糖，且通过正交设计优化了其酸水解工艺。 2．对水苏糖、棉子糖、甘露三糖和蔗糖进行了体外小鼠骨髓细胞增殖活性研究，结果表明：甘露三糖(1～1000μg／mL)和水苏糖(100μg／mL)的增殖作用与对照组相比有显著性差异，甘露三糖优于水苏糖，而棉子糖和蔗糖(0.01～1000μg／mL)无显著性影响。 3．对水苏糖和甘露三糖进行了小鼠造血祖细胞体外培养实验，结果表明： (1)水苏糖(0.01～1000μg／mL)和甘露三糖(0.01～1000μg／mL)对粒-单核系、早期红系和晚期红系造血祖细胞的增殖分化无直接促进作用。 (2)添加水苏糖(100μg／mL)和甘露三糖(10～100μg／mL)后制备的小鼠骨骼肌条件培养液能显著促进粒—单核系祖细胞的增殖分化；添加水苏糖