原发性肝癌患者外周血IL-2，sIL-2R，TNFα水平及NK细胞活性检测

目的:检测原发性肝癌患者外周血IL—2、sIL—2R、TNFα水平及NK细胞活性,并探讨患者细胞免疫功能低下的原因以及这些因素对于患者在临床上的影响。 方法:(1)采用MTT比色法检测30例原发性肝癌患者外周血单个核细胞白细胞介素2(IL—2)的诱生水平以及30例原发性肝癌患者外周血单个核细胞自然杀伤细胞(NK)活性。由于活的细胞具有吸收四甲基偶氮唑蓝(MTT)的能力,活化的线粒体能裂解四氮唑的环,而产生颜色反应。四甲基偶氮唑蓝是黄色可溶性物质,氧化后形成蓝色结晶体,后者经异丙醇作用溶解显色。根据显色深浅反映细胞代谢活性的强弱。MTT以每孔10ul加入培养的CTLL后再置37℃培育4小时后,取出,加入异丙醇,充分混匀以溶解深蓝色的结晶。在室温下静置10分钟后即可用波长为570nm的酶标仪检测。将所测得OD值输入计算机即可算出IL—2和NK的活性单位。 (2)采用ELISA法检测30例原发性肝癌患者外周血单个核细胞可溶性白细胞介素2受体(sIL—2R)以及30例原发性肝癌患者外周血单个核细胞肿瘤坏死因子α(TNFα)水平。这种方法的基本原理是:使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性;使抗原或抗体与某种酶联结为酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保持其免疫活性,又要保持其酶的活性。在测定时,把受检的标本(测定其中的抗原或抗体)和酶标的抗原或抗体按照不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反