柴胡疏肝散抗氧化活性及其活性成分柚皮苷药代动力学的研究

柴胡疏肝散(CSGS)是中国传统经典方剂,由七味药材组成,具有疏肝解郁,活血止痛的功效,临床上用于治疗消化系统、神经系统、心血管系统及妇科等各类疾病,药理研究表明其具有抗抑郁作用。当今,人们面临着来自各方面的巨大的精神压力,抑郁症已成为困扰我国的第二大类疾病。为进一步阐释CSGS抗抑郁的药理作用机制及物质基础,论文研究了柴胡疏肝散的体内外抗氧化活性,探讨抗氧化活性与抗抑郁作用之间的联系。并对复方中抗抑郁活性成分柚皮苷(NA)进行了药代动力学研究,考察复方中柚皮苷及单体柚皮苷在大鼠体内代谢规律的差异。 实验采用六种方法,评价CSGS水提物体外抗氧化活性。CSGS体外具有一定的铁离子还原能力和自由基清除能力,其还原能力即总抗氧化能力相当于0.24 mmol FeSO4每克复方水提物,清除DPPH(1,1-二苯基-2-苦基苯肼)自由基、ABTS[2,2-连氮(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐]阳离子自由基、O2·-(超氧阴离子)及·OH(羟自由基)的IC50分别为0.83 mg·mL-1、1.03 mg·mL-1、10.31 mg·mL-1、7.79 mg·mL-1,氧自由基吸收能力ORAC值为1.50±0.19μmol Trolox／mg。建立氧化应激模型,通过测定全血中谷胱甘肽(GSH)含量,肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MAD)含量考察CSGS对束缚导致氧化应激反应小鼠的体内作用。在束缚应激状态下,CSGS能显著改善机体中SOD及CAT活性,提高GSH含量,增强机体抗氧水平,抑制脂质过氧化,降低脂质代谢物MDA的含量。 柚皮苷(NA)为CSGS中入血的抗抑郁活性成分之一,实验采用LC-MS/MS建立专属性检测方法快速定量大鼠血清中药物含量。通过对大鼠口服CSGS水提物(2.5 g·kg-1)及方中相同剂量的单体NA (5.075 mg·kg-1)后的血清样品进行含量测定,发现两者血药浓度-时间关系曲线均呈现双峰现象,CSGS中两次达峰时间较NA向后推迟,表明NA的体内代谢可能存在肝肠循环。用药代动力学软件WinNonlin对所得数据进行分析,CSGS和NA单体的消除半衰期分别为171.8932min和255.7001min表明复方中NA比NA单体消除快,不易滞留,毒副作用小。两者进入血循环总量分别为840.2175 min*mg/L和114.0243 min*mg/L,表明复方中NA入血起效量较多,生物利用度更高。两者持续时间分别为523.3516min,274.8070 min,说明复方中的NA药效更为持久。 柴胡疏肝散可清除过氧自由基,抑制脂质过氧化反应,缓解氧化应激损伤,提高机体抗氧化能力,CSGS抗抑郁作用的发挥可能部分来自其抗氧化活性的贡献。复方中柚皮苷及单体柚皮苷在大鼠体内药物代谢的差异表明,复方中单体利用度更高、毒副作用小、疗效更为持久,也说明了复方组方用药的合理性。