化痰活血方及其有效成分梓醇对哮喘小鼠的作用及机制初探

目的： 通过卵清白蛋白（OVA）诱导的小鼠哮喘模型，研究化痰活血方及其有效成分梓醇的平喘作用，并探讨其发挥作用的分子机制。 方法： 本研究以OVA致敏激发建立小鼠哮喘模型，并以化痰活血方和梓醇进行干预。观察记录雾化激发过程中，动物的整体表现和引喘潜伏期；取肺组织进行HE染色和PAS染色，镜下观察肺组织病理改变和气道上皮杯状细胞的增生情况；采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测肺泡灌洗液（BALF）中γ干扰素（IFN-γ）、白介素4（IL-4）、白介素13（IL-13）、白介素17A（IL-17A）等细胞因子的含量；采用蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测肺组织中血管内皮生长因子受体2（VEGFR-2）和Notch受体Notch1的表达；采用免疫组织化学法检测肺组织Notch信号转录因子RBPJ的表达。 结果： （1）与正常组相比，哮喘模型组小鼠雾化激发过程中，出现烦躁不安，呼吸急促，腹肌抽搐，毛发竖起、大小便失禁等哮喘症状，引喘潜伏期明显缩短；病理学检查发现肺组织大量炎性细胞浸润、支气管粘膜水肿和上皮杯状细胞大量增生；BALF中IFN-γ含量显著减少，IL-4、IL-13、IL-17A含量显著增加；肺组织中VEGFR-2、Notch1、RBPJ等蛋白表达明显增加。 （2）与哮喘模型组相比，化痰活血方各剂量组小鼠哮喘症状均有改善，肺组织病理改变减轻，气道杯状细胞增生减少，BALF中IFN-γ含量提高，IL-4、IL-13、IL-17A含量减少；高、中剂量组小鼠肺组织中Notch1表达下降；各剂量组小鼠肺组织RBPJ蛋白表达下降。 （3）与哮喘模型组相比，梓醇各剂量组小鼠，哮喘症状明显改善，肺组织病理改变明显减轻，气道杯状细胞增生减少，BALF中IFN-γ含量提高，IL-4、IL-13、IL-17A含量减少；高、中剂量组小鼠肺组织VEGFR-2表达下降；梓醇各剂量组小鼠肺组织Notch1、RBPJ表达下降。 结论： 化痰活血方和梓醇对OVA诱导的小鼠哮喘均有治疗作用，可以改善哮喘小鼠的病理症状并抑制气道炎症。化痰活血方和梓醇可能通过调节Th1、Th2、Th17等CD4+Th细胞亚群的平衡发挥效用；特别是对Th2细胞活化的影响，可能与它们对Notch信号的调控有关。