消瘀接骨散对兔膝骨关节炎模型关节液中MMP-1、MMP-3影响的实验研究及其治疗KOA的临床观察

1目的膝骨关节炎(KOA)是临床上一种常见疾病,消瘀接骨散作为我院院内制剂治疗KOA具有很好疗效。本课题拟通过建立家兔膝骨关节炎模型进行实验研究,观察消瘀接骨散对膝骨关节炎关节液中基质金属蛋白酶1(MMP-1)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)表达的影响,探讨其治疗KOA部分药理效应及可能作用机制,并通过临床观察其治疗KOA的疗效及安全性,为消瘀接骨散治疗膝骨关节炎(KOA)提供实验基础及临床依据。2方法2.1实验部分选用健康清洁级新西兰大耳白兔32只,6月龄左右,雄雌各半,随机选取正常组、模型组、消瘀接骨散组、扶他林组,每组8只,除正常组外采用膝关节石膏制动造模方法进行造模,造模成功正常饲养并驱赶一周后进行药物治疗,疗程结束后进行标本制备,釆用HE染色观察软骨退变情况,ELISA法(酶联免疫吸附剂测定法)测定关节液上清液中MMP-1、MMP-3的含量。2.2临床部分按照纳入标准及排除标准选取KOA患者60例,随机分为治疗组(消瘀接骨散组)对照组(扶他林组)各30例。治疗组予以消瘀接骨散外用,每日一次,每次6-8小时。对照组予以扶他林外用,疗程为4周。疗程结束后,观察两组患者膝关节疼痛感觉评分(VAS疼痛评分)、Lequesne指数评分、中医证候量化评分以及血沉的变化,并根据主要症状及体征的变化来判定疗效,记录治疗过程有无明显毒副反应。3结果3.1实验部分3.1.1大体观察:正常组兔膝关节外观正常,无明显肿胀畸形,关节软骨呈半透明状,表面光滑完整,滑膜呈乳白色,无明显肿胀、肥厚、充血,关节滑液无色透明;消瘀接骨散组及扶他林组外观上稍有肿胀,关节软骨表面较正常组粗糙,滑膜增厚、稍有肿胀;扶他林组较消瘀接骨散组滑膜稍有充血,关节液稍混浊;模型组外观肿胀、畸形,颜色红肿,关节软骨表面粗糙不平,软骨透明度明显下降,滑膜有明显的炎症性改变、肿胀、充血,关节液混浊。3.1.2光镜下组织学观察:镜下观正常组软骨厚度正常,软骨基质着色均匀,软骨表面光滑,软骨细胞形态正常,排列整齐结构分层清晰可辨,潮线完整;消瘀接骨散组细胞排列规律尚可,偶而可见少量细胞簇集现象,关节软骨细胞有轻度变性,潮线尚完整;扶他林组细胞排列不整齐,关节各层软骨细胞出现簇集样生长,部分出现潮线不清晰和中断;模型组关节软骨破坏最是严重,软骨表面粗糙不平,软骨表面糜烂、完全剥脱,细胞排列紊乱,分布不均匀,软骨层次不清,潮线消失。3.1.3关节液中MMP-1和MMP-3水平的表达:根据关节液中所测检验结果进行统计学分析,各组间MMP-1含量比较差异均有统计学意义(F=124.6,P<0.01),组间多重比较,模型组高于正常组、消瘀接骨散组、扶他林组,且两两比较均有统计学意义(P<0.05);正常组与模型组MMP-3含量比较差异有统计学意义(P<0.01),模型组与消瘀接骨散组、扶他林组三者行单因素方差分析差异有统计学意义(F=151.9,P<0.05),对三组行SNK-q检验,提示模型组与消瘀接骨散组、扶他林组差异均有统计学意义(P<0.05),但消瘀接骨散组、扶他林组无明显统计学差异(P>0.05)。3.2临床部分3.2.1治疗组和对照组治疗后VAS疼痛评分与治疗前相比均有差异,差异有统计学意义(P<0.01),且在改善膝关节疼痛方面治疗组优于对照组。3.2.2治疗组和对照组治疗后Lequesne指数评分与治疗前相比均有差异,差异有统计学意义(P<0.01),在改善膝关节功能方面治疗组优于对照组。3.2.3治疗组与对照组治疗后中医证候量化评分与治疗前相比均有差异,差异有统计学意义(P<0.05),改善症状、体征方面治疗组优于对照组。3.2.4治疗组与对照组治疗后血沉与治疗前相比有差异,差异有统计学意义(P<0.05),但在改善血沉方面,两者无明显区别,差异无统计学意义(P>0.05)。3.2.5对两组患者进行临床症状及体征疗效评价,治疗组总有效率93.3%,对照组为76.6%,对两组患者治疗后临床疗效进行统计学分析差异有统计学意义(Z=-2.135,P=0.032),表明治疗组疗效优于对照组。4结论实验研究表明消瘀接骨散对家兔膝关节软骨具有保护作用,可以降低关节液中MMP-1、MMP-3的表达水平,推断其可能通过调节兔膝关节关节液中MMP-1、MMP-3的表达,以延缓关节软骨退变。临床观察表明消瘀接骨散是治疗KOA有效且无明显毒副作用的药物,值得临床进一步推广及应用。