对乙酰氨基酚诱导小鼠急性肝损伤模型机理研究

目的：急性肝损伤是肝脏疾病发生、发展以及最终走向肝功能衰竭的共同途径,建立与人类急性肝损伤的发展病变过程相类似的动物模型极其重要。急性肝损伤有很多种动物模型,本实验重点研究APAP引起的小鼠急性肝损伤的发病机制。对乙酰氨基酚(APAP)是缓解疼痛减少发热最广泛使用的药物之一。APAP一般在治疗剂量下是安全的,然而APAP的过量可能会导致严重的肝脏损害。方法：急性肝损伤模型组腹腔注射300mg·kg-1的APAP,正常组给予等效体积的生理盐水。APAP给药后在不同时间评估天冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,,同时观察肝组织中还原型谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的水平,并通过苏木精和伊红(H＆E)染色观察病理变化。从肝组织中提取的蛋白进行蛋白印迹分析法分析。结果：根据正常组的光学显微镜评估,肝实质的形态规则是显而易见的。模型组可见肝小叶内细胞明显被浸润且呈空泡状,小叶内也有严重的炎性细胞,且细胞浑浊明显出现核固缩,特别是在APAP处理4小时的小鼠显示出最严重坏死。在APAP给予后4h时,血清ALT和AST的水平与正常组比较明显增加(P<0.001),肝组织中GSH、GSH-PX含量与正常组比较明显降低(P<0.001)。Western印迹分析表明,在APAP给予后4h时,APAP活化了JNK和STAT3,而且pro-caspase-3和Bcl-2的蛋白表达也明显降低,在APAP给药后12小时JNK的表达恢复到接近正常对照组。结论：本实验通过腹腔注射途径给予小鼠300mg·kg-1的APAP,可以成功诱导小鼠急性肝损伤,为继续探索保肝药物打下了坚实的基础,并提供理论依据。