农杆菌介导的百合ACC氧化酶反义基因遗传转化研究

百合是世界著名的五大切花之一,其花朵硕大,色彩各异,姿态优雅,芳香浓郁,倍受人们喜爱。全世界切花百合的每年销量数以亿计。但是,百合与其它鲜切花一样随着花朵的开放迅速衰老,如何延长百合花朵的寿命已成为生产与消费上急需解决的实际问题,也是近年来科学研究的主要课题之一。已有的研究结果表明,百合为乙烯释放型花卉,百合花朵开放时,伴随着乙烯的释放和衰老。因此,将ACC氧化酶反义基因导入百合体细胞中,通过调控百合乙烯表达来控制百合的衰老,以达到延长百合花期的目的。本研究是在构建好的百合ACC氧化酶反义基因基础上,以东方百合‘索邦’为试材,建立百合遗传转化愈伤组织受体系统和直接分化受体系统,并采用农杆菌介导法进行ACC氧化酶反义基因转化研究,以获得转化的百合ACC氧化酶反义基因植株,为百合遗传转化提供依据。主要的研究结果如下: 1.建立了东方百合‘索邦’愈伤组织受体系统 以东方百合‘索邦’田间取材的鳞片、再生形成的小鳞片及叶片为外植体,建立了愈伤组织受体系统,3种外植体诱导愈伤组织的最适培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.4 mg/L+蔗糖90g/L+VB1 4.0 mg/L;愈伤组织不定芽分化的最适培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L;愈伤组织潮霉素抗性质量浓度为20mg/L。 2.建立了东方百合‘索邦’直接分化受体系统 以东方百合‘索邦’再生形成的小鳞片和叶片为外植体,诱导分化不定芽的最适培养基分别为MS+NAA 1.5 mg/L,MS+NAA 0.5 mg/L;小鳞片和叶片潮霉素抗性质量浓度为15 mg/L。 3.建立了根癌农杆菌介导的百合遗传转化体系