滇重楼抗肿瘤活性成分的研究

中药重楼为百合科植物滇重楼(Paris polyphylla Smith var. yunnanensis(Franch.) Hand.-Mazz.)和七叶一枝花(Paris polyphylla Smith var. chinensis(Franch.)Hara)两个变种的干燥根茎。主要分布于四川、云贵等地。它的药用历史悠久,且早已为民间用于抗癌药物,且是著名中成药云南白药季德胜蛇药片、宫血宁胶囊等的主要组成药物。其主要的化学成分为甾体皂苷类、植物蜕皮激素类、黄酮类、甾醇类。前期实验表明,滇重楼乙酸乙酯和正丁醇提取物具有较强的抗肿瘤作用。为寻找具有生物活性的化学单体,本文对滇重楼进行了系统地化学成分研究。 本课题采用硅胶柱层析、凝胶色谱、制备薄层色谱(PTLC)及制备高效液相色谱(PHPLC)等分离手段,对滇重楼各萃取部分进行了系统地分离,从中共分离到73个单体化合物,除了通过1H-NMR初步鉴定的脂肪酸类化合物之外,还进一步通过13C-NMR,2D-NMR及高分辨质谱等波谱解析方法鉴定了其中18个化合物的结构,其余化合物正在鉴定中。其中2个为新化合物:ParispolysideF(1)和ParispolyisdeG(2);3个黄酮苷(3-5);1个鞘糖脂(6);1个乙基-α-D-呋喃果糖苷(7);1个β-蜕皮激素(8);1个豆甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(9);9个甾体皂苷(10-18)。其中化合物3-7为首次从重楼属植物中分离得到的,而3-5是从重楼属植物中首次分到的除以往报道的山奈酚类黄酮苷之外的另一类异鼠李素类的黄酮苷;化合物10和11为首次从该种植物中分离得到的甾体皂苷。 本课题在前期实验证明滇重楼提取物具有明确的抗肿瘤作用的基础上,以LA795小鼠肺腺癌细胞为研究对象,考察了分离鉴定的单体化合物的抗肿瘤作用。研究表明,化合物1-6对LA795细胞具有一定的抑制作用,其中新化合物1、2和化合物4、10、11的活性相对较好,而化合物12-18对LA795细胞均具有较强的细胞毒活性。在细胞毒实验结果的基础上,初步讨论了细胞毒活性与化合物结构之间的构效关系。药理实验结果提示无论是薯蓣皂苷还是偏诺皂苷都具有一定的细胞毒作用,且17位上羟基的有无对细胞毒作用无明显影响。皂苷元C-3位连接糖链时,糖的数目、连接位置及组成类型对其生物活性都起着至关重要的作用。