龙胆苦苷(Gentiopicroside)广泛地存在于龙胆属植物中,特别是龙胆和当药中,属于裂环环烯醚萜类。有文献报道龙胆苦苷有抗菌、清除自由基、促进胆汁分泌、保护肝脏等功能,最新有文献报道龙胆苦苷可以作用于神经中枢系统,有抗惊厥、抗忧郁、止痛等功能。本课题主要对龙胆苦苷进行了以下几方面研究:
1.四个龙胆苦苷的衍生物的合成
龙胆苦苷在β-葡萄糖苷酶催化下生成龙胆苦醛,与氨水反应转化为秦艽碱甲,与乙酸酐在高氯酸的催化下生成四乙酰龙胆苦苷,在Pd-C催化作用下高压加氢,经红外、核磁、质谱确定了结构。并采用抗炎和镇痛动物模型以及MTT法比较了它们的药理活性,初步探讨了构效关系。
2.龙胆苦苷用于治疗类风湿性关节炎
类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一类以慢性、对称性、多关节炎症为主要表现的自身免疫性疾病,其侵犯的靶器官主要是关节滑膜,最终可影响关节功能甚至致残。关节炎的治疗主要包括止痛、抗炎、以及免疫调节等方面。
为了研究龙胆苦苷的镇痛作用,我们采用了一个化学刺激(扭体法)两个热刺激(甩尾法、热板法)的伤害性动物模型,龙胆苦苷明显的抑制了小鼠的扭体次数,延长了小鼠对热的痛阈值,呈量效关系。扭体法一般用于外周镇痛药物实验,甩尾一般认为是脊髓反射,热板一般用于中枢药物检测,这就说明龙胆苦苷对中枢和外周都有一定镇痛作用。在抗炎实验中对二甲苯所致耳廓肿胀,蛋清所致足趾肿胀等急性炎症和棉球诱导的组织增生都有一定抑制作用。
在CFA大鼠佐剂模型中,给予龙胆苦苷治疗的大鼠血清中的白介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子(TNF-α)含量要比模型动物血清中的含量要低,这说明龙胆苦苷的免疫调节作用是通过调控TNF-α和IL-1炎症介质来实现的。
3.龙胆苦苷的镇痛机理
前扣带回(ACC)被认为和疼痛的传导和调节密切相关,疼痛可以刺激额叶前部的突触传递和ACC处谷氨酸NMDA NR2B受体亚基表达的增加。通过全细胞膜片钳可以记录到龙胆苦苷降低了NR2B受体在ACC处介导的突触电流,通过Western Blot实验进一步证明了龙胆苦苷的镇痛作用是通过向下调节NMDA NR2B受体在ACC的表达数量来实现的。
4龙胆苦苷抗柯萨奇病毒
柯萨奇病毒(Coxsackievirus,CV)是人类重要的病原体,可引起严重的胰腺炎和心肌炎,常导致年轻个体的死亡。柯萨奇B组病毒是急性、慢性病毒性心肌炎的主要病因,也是心肌衰蝎和扩张性心肌病的重要原因。现代医学应用分子杂交和心脏活检等手段证实心脏的柯萨奇B组病毒感染中以3型(CVB3)最为多见。龙胆苦苷抗柯萨奇病毒作用是通过体外实验来检测的,被感染CVB3的原代乳鼠心肌细胞加入龙胆苦苷后,病毒滴度明显降低,CVB3导致的心肌细胞凋亡也明显减少,这说明了龙胆苦苷体外有抗CVB3的活性,将来有可能用于CVB3感染的心肌炎治疗。
5.抑制人肺腺癌细胞株A549
体外均有一定抑制作用,但与阳性对照药相比用药浓度较大。
