理气中药联合伊托必利对糖尿病大鼠胃排空率的影响及机理研究

目的：糖尿病是临床上一种常见病和多发病,其合并症发病率为22%,累及消化道导致胃排空延迟者称为糖尿病性胃轻瘫(diabetic gastroparesis,DGP), Mchugh及Erbas等统计,1型或2型糖尿病患者至少有50%以上伴有糖尿病胃轻瘫,主要与神经病变、Cajal间质细胞(ICC)病变、胃肠激素、高血糖、微血管病变、幽门螺旋杆菌(Helicobacten pylori, HP)感染等因素有关。本课题通过ALX诱导建立糖尿病大鼠模型,选用理气类中草药与伊托必利联合治疗,观察不同组别的治疗效果,证实联合用药治疗糖尿病胃轻瘫较单药治疗的优势,并在神经肌肉病变水平阐明其发生作用的可能机制,为进一步临床研究打下基础。 方法：第一阶段：购买动物(随机选取SPF级SD雄性大鼠70只,体重220士20g)试剂,进行实验前准备。 第二阶段：制作糖尿病大鼠模型。70只SD大鼠观察一周后,按计算机随机数字表随机分为分为五组。A组(对照组)10只,B组(糖尿病组)15只,C组(糖尿病加中药组)15只,D组(糖尿病加伊托必利组)15只,E组(糖尿病加伊托必利联合中药组)15只。造模前禁食24小时,B、 C、 D、 E组大鼠腹腔注射5%四氧嘧啶水溶液120mg/kg,每日一次,连续两日。72小时后,连续三天空腹血糖超过13.6mmol/1为制模成功。 第三阶段：分组饲养。A、B组给予普通饲料并每日灌服生理盐水2ml/200g,C组在给予普通饲料的基础上每日灌服中药2ml/100g,D组在给予普通饲料的基础上每日灌服伊托必利12.5mg/100g,E组在给予普通饲料的基础上每日灌服伊托必利12.5mg/100g+中药2ml/100g。观察各组大鼠的血糖、体重、摄食量。第四阶段：处死动物,标本处理。饲养24周后,禁食24小时,分别灌服0.1%甲基橙水溶液0.2ml/只,60分钟后脱颈处死。取出胃,蒸馏水洗出胃内容物,测量甲基橙残留率,计算胃排空率(排空率=标准值—残留率值)。胃组织切片染色,观察大鼠胃肌间神经丛和平滑肌形态学改变。 结果：(1)与正常组比较,糖尿病鼠的胃内甲基橙残留量较多,胃排空时间显著延长(P<0.01)；(2)给予理气中药或伊托必利组治疗可改善糖尿病鼠的胃排空速度(P<0.05)；理气中药联合伊托必利组对糖尿病鼠胃排空的改善效果明显优于单用理气中药组或伊托必利组(P<0.01)。(3)正常组胃平滑肌细胞排列规则紧密,细胞间间隙适中,未见空泡变样变。模型组胃平滑肌,平滑肌细胞胞浆染色淡,透亮,有空泡样变性。西药组胃平滑肌,平滑肌细胞胞浆染色淡,透亮,有空泡样变性,甚至塌陷。中药组胃平滑肌,平滑肌细胞排列尚规则,空泡变少。中药加西药组胃平滑肌,平滑肌细胞排列较规则,空泡较少。 结论： 1、理气中药联合伊托必利可有效促进糖尿病大鼠胃动力,在促进胃方面排空效果优于单用理气中药或伊托必利组(P<0.01)。 2、四氧嘧啶诱导DM大鼠存在胃排空延迟,胃平滑肌形态改变,胃肌间神经丛数目减少,nNOS染色阳性神经也明显减少,提示糖尿病胃轻瘫与平滑肌及肌间神经细胞有密不可分的关系,应用理气中药及伊托必利都可以不同程度的改善胃排空状况,且两者联用效果更加明显(P<0.01),其机制可能是对平滑肌和肌间神经丛的保护作用,减少其损伤,从而为临床治疗糖尿病胃轻瘫提供了新的治疗途径。