补肾强督法治疗强直性脊柱炎的疗效及抗骨化作用初探

目的：1.通过对应用中医补肾强督法治疗强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)的疗效和安全性进行文献的系统评价及meta分析,为补肾强督法治疗AS提供初级循证医学证据。2.采用随机、对照、前瞻性临床研究,客观评价中医补肾强督法综合方案治疗AS在关节功能状态及影像学方面的临床疗效,揭示其抗骨化潜能,并为后期大样本、多中心的随机对照研究提供参考。3.以Connexin43 (Cx43)为靶点,研究补肾强督方药对体外培养的大鼠成纤维细胞增殖及成骨分化的影响,初步探讨补肾强督法抗AS异位骨化的机制,为其临床疗效提供科学证据。方法：1.系统评价系统评价近30年间发表的应用补肾强督法治疗AS的临床随机对照研究的文献,通过分析文献确定检索主题词,计算机检索PubMed (1985/2015-5)、Embase (1985/2015-5)、ScienceDirect (1985/2015-5)、CBM (1985/2015-5)、VIP (1985/2015-5)、CNKI (1985/2015-5)和WANFANG(1985/2015-5),使用Note express V3.0.2.6367进行文献数据库的管理,通过Excel进行数据的提取,采用Cochrane Review Manager 5.2进行偏倚风险评价和Meta分析。2.临床研究纳入肾虚督寒证AS患者30例,随机分为中医试验组及西医对照组,两组各15例,均采用功能锻炼作为基础治疗,试验组服用补肾强督治偻汤加减,并联合督灸,对照组服用塞来昔布,疗程均为48周,采用ASAS工作组推荐的基于CRP的AS疾病活动指数(ASDAS-CRP)为主要疗效评价标准,并通过巴氏AS功能指数(BASFI),巴氏AS测量指数(BASMI)和胸廓活动度,AS生活质量问卷(ASQoL)及骶髂关节核磁(MRI)评价补肾强督综合方案治疗AS在关节功能状态及影像学方面的临床疗效,初步探讨其抗骨化潜能。3.实验研究以体外培养的大鼠髋关节周围韧带成纤维细胞为研究对象,采用MTS法观察补肾强督治偻汤对成纤维细胞增殖的影响,并采用免疫印迹(WB)法探究补肾强督治偻汤对成纤维细胞成骨标志蛋白及Cx43蛋白表达的影响。结果：1.系统评价初检出相关文献923篇,排除重复文献214篇,排除非随机对照试验、动物试验、综述、经验论述673篇,排除研究设计、干预措施、结局指标等不符合纳入／排除标准的文献23篇,纳入可分析文献13篇,共972例病例。结果显示,以补肾强督法治疗方案/基于补肾强督法的中西医结合治疗方案治疗AS, AS疗效评价标准20(ASAS20)达标率、中医证候改善率、血沉(ESR)、疼痛视觉模拟评分法(Visual Analogue Scale/Score, VAS)、腰椎活动度(Schober)均高于西医治疗组(RR= 1.19 [1.03, 1.24],Z=2.37,P=0.02; RR= 1.17 [1.07,1.28],Z=3.44,P=0.0006; MD=-0.62 [-1.08,-0.17], Z=2.67, P=0.008; MD=-14.23 [-22.58,-5.88], Z=3.34, P=0.0008; MD=0.36 [0.20,0.53], Z=4.41, P<0.0001)。2.临床研究中医补肾强督法综合方案和西医综合方案均可显著降低AS患者ASDAS-CRP、 BASFI、ASQoL并改善骶髂关节骨髓水肿评分(SPARCC评分)(P<0.05),但对BASMI和胸廓活动度无明显改善作用(P>0.05),两组差异无显著性意义(P>0.05)；在改善AS关节面硬化、侵蚀及骨赘的形成情况的骨质病变方面中医试验组优于西医对照组(P<0.05)。3.实验研究补肾强督方药对大鼠成纤维细胞增殖具有抑制作用,且呈现出一定的浓度依赖性,随药物浓度升高而抑制作用增强,500μg/ml的补肾强督方药对大鼠成纤维细胞增殖的抑制率达(18.791±4.637)%(P<0.001)；补肾强督方药以及塞来昔布可同时下调成纤维细胞核心结合因子(Core Binding Factorα1, Cbfα1)、Cx43及磷酸化的Cx43(pCx43)蛋白的表达(P<0.05或P<0.001),两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论：1.中医补肾强督法治疗方案/基于补肾强督的中西医结合治疗方案治疗AS与单纯西医治疗AS比较,疗效较好,为中医补肾强督法应用于AS治疗提供了有力证据。2.补肾强督法综合方案治疗AS可有效改善患者关节功能状态,纠正患者骶髂关节骨髓水肿,且在骨质改善上展现出较西医对照组更好的疗效,提示中医补肾强督法综合方案治疗AS疗效肯定,且可能在抗骨化作用上具有一定潜能和优势。3.补肾强督法可能通过抑制成纤维细胞的增殖并调节Cx43半通道而抑制韧带成纤维细胞的成骨分化,起到抗AS骨化、延缓AS骨质病变的作用。