白花蛇舌草甾体类化学成分及其β-谷甾醇含量测定方法的研究

白花蛇舌草[Oldenlandia diffusa(Willd．)Roxb．]始载于《广西中药志》，为茜草科植物的带根全草。其味苦、甘、寒，入心、肝、脾三经，功效清热解毒，清热利湿。民间常用此药治疗咽喉肿痛、癌肿等。现代药理表明白花蛇舌草具有抗菌、消炎和抗肿瘤作用，其中β-谷甾醇为白花蛇舌草中抗肿瘤有效成分之一。 实验目的：对白花蛇舌草中甾体类化学成分进行提取、分离和鉴定，并首次用薄层扫描法对白花蛇舌草中的β-谷甾醇含量测定进行研究。 实验方法： 提取 将白花蛇舌草粉碎成粗粉，加氯仿，加热回流提取三次，滤过；合并氯仿提取液，减压回收氯仿，浓缩至稠膏状，置冰箱，备用。 分离 将白花蛇舌草提取物加少量氯仿溶解，用适量的硅胶粉制样。样品与吸附剂按1:80的比例上硅胶柱，用石油醚-丙酮为洗脱剂，进行梯度洗脱，分段收集，浓缩、结晶 分别得到化合物A和B。 鉴定 化合物A、B分别经熔点、红外、核磁共振、质谱等鉴定，证明为豆甾醇和β-谷甾醇。 含量测定 精密称取干燥至恒重的白花蛇舌草5克，置索氏提取器中，加适量氯仿加热回流提取6小时，至回流液中无β-谷甾醇(薄层检测)。加1％氢氧化钠溶液150ml洗涤二次，以除去酸性杂质；再用0.5％盐酸溶液150ml洗涤一次，除去碱性杂质；最后用蒸馏水洗去残留盐酸。合并洗涤液，用适量氯仿萃取。将氯仿萃取液与氯仿提取液合并，减压回收氯仿，浓缩至适量，再用氯仿定容至10ml，以β-谷甾醇作为对照品，用薄层扫描法测定白花蛇舌草中β-谷甾醇的含量。 实验结果：白花蛇舌草粗粉用氯仿加热回流提取后，上硅胶柱，以石油醚-丙酮为洗脱剂进行梯度洗脱，洗脱液经浓缩、结晶，得化合物胆甾醇和β-谷甾醇；并以β-谷甾醇作为对照品，用薄层扫描法测定了不同批次的白花蛇舌草中β-谷甾醇的含量，其范围为0.09～0.20％。 结论：将白花蛇舌草用氯仿提取，经硅胶柱层析，可分离得到纯度较高的胆甾醇和β-谷甾醇；并可用薄层扫描法测定白花蛇舌草中的的β-谷甾醇含量，此法简单准确，重现性好，回收率高，结果稳定，为白花蛇舌草的质量研究提供了方法和依据。