甘草苷的抗抑郁作用及其机理研究

抑郁症（depression）是由各种原因引起的以抑郁为主要症状的一组心境障碍（mood disorders）或情感性障碍（affective disorders）,是一组以抑郁心境自我体验为中心的临床症状群或状态。在精神疾病中,抑郁症的发病率仅次于精神分裂症,而且约有15%的抑郁症患者有自杀倾向,不利于个人的健康和社会的稳定。抑郁症由于其发病率高且难以根治,针对单一环节、单一靶点的抗抑郁药物毒副作用比较大,费用比较高、易反复等特点,所以研究开发新的、安全有效的抗抑郁药物有很重要的社会及经济效益。 甘草苷提取自治疗中医郁症的传统方剂甘麦大枣汤。经过拆方对比试验,以及单味药试验,经分离有效部位,结合动物实验,发现甘草苷为主要抗抑郁成分。在此基础上我们对甘草苷的药理作用及机理进行探讨。 一甘草苷对体外神经细胞的保护作用研究 1甘草苷对BV2细胞的保护作用 在96孔板中正常生长的BV2细胞中分别加不同剂量的甘草苷溶液,2小时后分别加入谷氨酸溶液建立BV2细胞谷氨酸损伤模型,40小时后,采用MTT法检测细胞活性。用同样的方法在6孔板中正常生长的BV2细胞中分别加入一定量的甘草苷溶液,2小时后分别加入谷氨酸溶液建立BV2细胞谷氨酸损伤模型,40小时后,采用AnnexinV-FITC试剂盒检测细胞凋亡。实验结果表明,甘草苷虽然不能完全阻止谷氨酸损伤导致的BV2细胞死亡,但可以降低其死亡率;而且甘草苷在一定程度上可以延缓谷氨酸损伤的BV2细胞的凋亡。 2甘草苷含药血清对神经细胞的保护作用 按以上方法建立BV2细胞谷氨酸损伤模型,分别加入空白血清、各剂量甘草苷含药血清,MTT法检测细胞活性,结果显示其细胞保护作用不十分明显,但从细胞形态及作用趋势看来,还是有一定影响,其作用还有待确证。 二甘草苷抗抑郁症的神经受体机理研究 1甘草苷对CUMS大鼠糖水偏嗜度的影响 造慢性应激动物模型大鼠模型,按剂量给予甘草苷,同时进行糖水试验,记录大鼠的糖水消耗量、纯水消耗量,计算糖水偏嗜度。对CUMS大鼠给药前后的蔗糖偏嗜度的监测实验结果显示,甘草苷一定程度上可以逆转CUMS模型大鼠糖水饮用量的减少,体现了较好地抗抑郁作用。 2甘草苷对CUMS大鼠体重的影响 造慢性应激动物模型大鼠模型,按剂量给予甘草苷,同时记录体重。对CUMS大鼠给药前后的体重比较结果显示,甘草苷对CUMS模型大鼠体重无明显影响。推测可能与采用了比较轻微的刺激方法有关。 3甘草苷对CUMS大鼠脑中5-HT1A受体的影响 采用免疫组化染色的技术,对脑中5-HT1A受体进行染色,用Image Pro Plus 6.0图像分析软件测定大鼠脑中海马CA1区、海马CA3区、扣带回及下丘脑四脑区的累积光密度（IOD）,来比较各组动物脑中5-HT1A受体。结果显示,慢性应激刺激后,大鼠脑中各脑区5-HT1A受体出现下调趋势,给予阳性药氟西汀和甘草苷的各组对各脑区（除扣带回外）的5-HT1A受体下调也表现出一定的逆转作用,但统计学检验各组间均无明显差异,甘草苷对CUMS大鼠脑中5-HT1A受体的作用有待进一步确证。 4甘草苷对CUMS大鼠脑中5-HT2A受体的影响 采用同样的方法测定大鼠脑中海马CA1区、海马CA3区、扣带回及下丘脑四脑区的累积光密度（IOD）,来比较各组动物脑中5-HT2A受体的密度。结果显示,慢性应激刺激后,大鼠脑中各脑区5-HT2A受体出现上调趋势;给予阳性药氟西汀后有一定逆转作用;而给予甘草苷的各组对各脑区5-HT2A受体上调则没有表现出逆转作用,且统计学检验各组间均无明显差异,甘草苷对CUMS大鼠脑中5-HT2A受体的作用有待进一步研究。 综上所述,甘草苷及其含药血清在体外对小胶质细胞BV2谷氨酸损伤均有一定的保护作用,提示甘草苷的抗抑郁活性可能与其对神经细胞的保护作用有关,但由于甘草苷的体内代谢研究还缺乏可靠的资料,这一作用还有待深入探讨;动物实验显示,甘草苷可明显逆转慢性温和应激刺激模型大鼠糖水偏嗜度的减少,能够缓解抑郁症的中心症状既快感缺乏,对该模型作用确切;甘草苷对模型大鼠脑内5-HT受体的影响,尚需进一步研究。