黑木耳多糖分离纯化、理化性质及抗疲劳功能的研究

黑木耳(Auricularia auricula)隶属于真菌门,担子菌纲,木耳目,木耳科,是我国重要的药食兼用真菌,其主要活性成分——黑木耳多糖具有调节人体免疫系统、降血压、降血脂、抗肿瘤、增强肠胃功能和护肝等功效。 本文以黑木耳子实体为原料,利用现代分离分析手段,对黑木耳多糖的提取工艺、分离纯化、理化性质以及抗疲劳活性进行了研究,主要结果如下: 1、分别对传统水提法、微波和超声辅助提取法提取多糖的工艺进行优化,并研究了微波和超声波对提取多糖的分子量分布的影响。在优化的最佳工艺条件下,传统水提法、微波和超声辅助提取法的一次提取得率分别为18%-19%、28%-29%和24%-25%,二次提取得率分别达22%-23%、33%-34%和30%-31%。微波和超声辅助提取法均能显著提高黑木耳多糖得率,促进大分子量组分溶出,但对小分子量组分的溶出会产生一定影响。 2、精制多糖(AAP,经脱蛋白、脱色和透析处理)经DEAE Sephadex A-25离子交换层析和Sephadex G-200排阻层析分离纯化后,得到了三个主要组分,分别为AAPⅠ-a、AAPⅡ-a和AAPⅢ-a,经紫外扫描表明它们不含核酸和蛋白质,经凝胶柱层析和高效液相色谱鉴定均为单一组分。 3、黑木耳多糖的主要组分AAPⅠ-a、AAPⅡ-a和AAPⅢ-a均为淡黄色絮状固体。经凝胶渗透色谱分析,它们的重均分子量(?)分别为1.37×10～4Dal、1.55×10～4Dal、8.68×10～5Dal,数均分子量(?)分别为1.26×10～4Dal、1.27×10～4Dal和4.12×10～4Dal。经高效液相色谱分析,AAPⅠ-a由葡萄糖组成;AAPⅡ-a由木糖和葡萄糖组成,摩尔比为1.33:1;AAPⅢ-a由木糖和葡萄糖组成,摩尔比为1:2.28。经红外光谱确定AAPⅠ-a和AAPⅡ-a为β-构型的吡喃糖,AAPⅢ-a为呋喃糖。 4、AAP和AAPⅢ-a均能显著延长小鼠的力竭游泳时间;提高小鼠体内肝糖原和肌糖原的储备量和恢复率;降低小鼠运动后血乳酸的增长量,加速小鼠体内血乳酸的清除率;AAPⅢ-a能降低小鼠运动后血尿素氮的增长量,加速小鼠体内血尿素氮的清除率;AAPⅢ-a的效果优于AAP,以AAP-Ⅲ-a 100 mg/(kg·bw·d)效果最好。