PRS联合用药抗日本血吸虫效果及其作用机制的初步研究

第一部分PRS与PZQ及Art联合应用抗日本血吸虫的作用 目的：观察比较吡喹酮（PZQ）、青蒿琥酯（Art）单独给药及与白头翁总皂苷（PRS）联合用药时体内对日本血吸虫的杀灭效果的影响。 方法：小鼠感染日本血吸虫尾蚴后随机分为5组（每组10只），即实验1组、2组：分别在35d时一次性灌服吡喹酮、青蒿琥酯200mg/kg；实验3组、4组：分别在35d时灌服吡喹酮、青蒿琥酯200mg/kg，36d时灌服白头翁总皂苷200mg/kg；空白对照组。以上各组于感染后42d后剖杀小鼠，观察模型动物肝脏形态变化，解剖小鼠计算减虫率和减雌率，并消化肝脏计算减卵率。 结果：PZQ和PRS联合应用组杀虫效果明显，形态观察发现，与对照组动物肝脏外观相似：色泽鲜红、外表光滑平整，质地柔软，且无虫卵结节，而其他实验组均存在一定程度的虫卵结节，且肝脏体表呈灰色、凹凸不平整。成虫期药物作用后检获虫数与对照组相比，均有一定程度的减少，联合用药组优于单独给药组，其中PZQ和PRS联合应用组减虫率、减雌率和肝脏组织减卵率上较其他实验组佳。 结论：PZQ、Art与PRS联合应用可增强药物抗日本血吸虫的作用，且对动物肝脏具有一定保护作用。 第二部分PRS对血吸虫生殖系统的影响 目的：体内外实验观察PRS对日本血吸虫成虫产卵量及生殖器官形态的影响，并通过其抗日本血吸虫的生殖作用探讨其对血吸虫的杀灭作用。 方法：小鼠感染日本血吸虫尾蚴后随机分为2组（每组10只）：即实验组在20d一次性灌服PRS400mg/kg，及空白对照组。感染42d后剖杀小鼠，消化肝脏并计算减卵率；挑选合抱虫体，体外观察虫体产卵情况，并制作肝组织和虫体切片，在光镜下观察PRS对肝脏形态、质地等方面的影响（如肉芽肿的变化和虫体生殖器官的变化）。 结果：实验组小鼠体内减虫率、减雌率及减卵率与对照组相比，均显著减少（P<0.05），且体外培养的结果与体内产卵结果一致。形态学观察发现，实验组雌虫卵巢发育较对照组缓慢；进一步观察发现给药组雌虫卵巢实质中，未成熟的卵原细胞和卵母细胞较多，成熟卵细胞较少，且成熟卵细胞排列较疏松，胞浆染色较深，细胞形状不规则，核仁不明显（以上均与对照组比较），而对雌虫卵黄腺和雄虫睾丸影响较小。 结论：PRS能在一定程度上抑制血吸虫雌虫卵巢的发育，抑制雌虫的产卵，具有较强的抗日本血吸虫雌虫生殖的作用，对于有效控制血吸虫的繁殖具有较理想的作用。 第三部分PRS对童虫期血吸虫DNA和蛋白质代谢的影响 目的：观察白头翁总皂苷对童虫核酸、蛋白质含量及标记核苷参入虫体DNA量的影响 方法：小鼠感染日本血吸虫后随机分为2组，每组10只：其中一组在18d一次性灌服白头翁总皂苷400mg/kg，一组不给药。24h后灌注法收集虫体，用Bradford标准曲线法及紫外吸收法测定白头翁总皂苷对血吸虫18d童虫蛋白质含量及DNA含量的影响；在含有3HTdR的培养基中培养10条虫体24h，然后用滤膜法、匀浆法测定白头翁总皂苷对标记核苷参入DNA的影响。 结果：白头翁总皂苷作用后，虫体的蛋白质和DNA含量和对照组比较均明显的减少，减少率分别为32．6％和22．2％，而在含有3HTdR的培养基里培养24h后，童虫摄入标记的核苷和核苷参入童虫DNA的量和对照组比较也明显地减少，减少率分别达59.8％和39.8％。 结论：白头翁总皂苷能够致使日本血吸虫18d童虫蛋白质和DNA的含量降低，也能够显著抑制虫体对标记核苷的摄入并能减少标记核苷参入虫体DNA的量。