天彭牡丹‘彭州紫’组织培养技术研究

牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)具有“花中之王”的美誉,其栽培历史悠久,品种繁多,有较高的园林观赏和药用价值。本研究以2-3年生四川天彭牡丹‘彭州紫’(Paeonia suffruticosa'Pengzhou Zi')的腋芽为外植体,进行植株再生技术体系试验,通过正交设计、完全组合设计等,并结合方差分析、多重比较等,筛选出适合彭州紫牡丹腋芽离体培养各个阶段最佳的培养基配方,包括褐化抑制培养、诱导与增殖培养、生根培养与移栽阶段,探讨了不同基本培养基、激素种类、浓度及配比、褐化抑制剂、移栽基质等对植株再生的影响,为实现‘彭州紫’的快速繁殖、完善牡丹的组培体系、大规模商业化生产提供理论依据和科技支撑。结果表明： 1.在褐化抑制培养的试验中,研究了取材时间、暗培养时间、活性炭、维生素C、硝酸银对褐变现象的抑制作用,结果表明：取材时间、暗培养时间、活性炭、硝酸银等因素的能有效控制褐变,其中效果最佳的是活性炭1.0g/L,而维生素C不能有效控制褐变。 最佳的抑制褐化措施是,先将二月份所采集的经消毒处理后的腋芽在添加活性炭1.0g/L的培基养中处理7d,然后转入不含活性炭的培养基中进行下一阶段的诱导与增殖培养。如此既能有效控制褐化,又避免活性炭长期吸附对生长和增殖造成的影响。 2.腋芽萌发诱导与增殖培养的最佳培养基为：MS+6-BA1.Omg/L+NAA0.1mg/L。在该培养基上,萌发率达到95.37%,增殖倍数达到4.34,且6-BA和NAA对萌发率和增殖倍数影响极显著,较高浓度的6-BA能提高诱导率与增殖倍数,但是当6-BA过高,容易导致芽苗的玻璃化。 3.利用五因素四水平正交试验设计进行生根培养,结果表明：基本培养基类型和IBA对生根率影响极显著,NAA、基本培养基和IBA对生根质量影响极显著,而IAA对生根率和生根质量影响小,均不显著。 最佳的生根培养基为：1/2MS+NAA0.4mg/L+IBA2.0mg/L,生根率达到88.89%,根多且长,根系质量最佳。而在其余的处理中,一些未能生根的组培苗,其愈伤组织边缘多形成类似于根的锯齿状物。 4.移栽成活率低是目前牡丹植物组织培养中的难题,在移栽试验中,先对生根苗炼苗5d,之后采用四种混合移栽基质进行培养,3周后统计成活率和生长状况得出最佳的移栽基质为：河沙、蛭石、木屑(1：1：1)的混合基质,成活率达到为46.88%。