肝郁脾虚证模型大鼠下丘脑—垂体—肾上腺轴的变化及逍遥散的调整作用

1理论探讨 本课题利用慢性束缚的方法,模拟肝郁日久,木郁乘土,肝郁脾虚的病理演变过程,成功复制出大鼠肝郁脾虚证模型。慢性束缚应激模拟了肝失疏泄的病理过程,而逍遥散的治疗促进了肝主疏泄功能恢复。由于慢性应激涉及到人体多个系统,在不同应激原、不同个体、不同环境下,可能导致的结果也不相同,给预防和治疗慢性应激所致疾病造成了困难,而中医药的整体观念、辨证论治、个体化诊疗等理念在这方面显示出了更大的优越性。逍遥散是治疗肝郁脾虚证的名方,本实验从逍遥散入手,探讨逍遥散的调节作用。 应激反应是所有生物对紧张性事件的适应性反应,对生物的存活具有十分重要的意义。在应激反应的产生和发展过程中,神经、内分泌、免疫三个系统间是相互联系、相互影响的,心理应激发生首先作用于大脑,引起交感神经-肾上腺髓质系统的兴奋；而脑内内分泌机能改变的最主要的途径是下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴系被激活。慢性应激状态下,HPA轴的持续激活是其病理机制的核心。因此本课题的着眼点放在慢性应激后的HPA轴对其的调整上。 2实验研究 本实验由两部分组成。实验一,肝郁脾虚证大鼠模型的建立与评价。从动物行为学着手、观察宏观表征和检测反应小肠吸收功能的血清D-木糖含量确证慢性束缚应激方法造成的大鼠肝郁脾虚证模型；实验二,肝郁脾虚证大鼠HPA轴变化及逍遥散调节作用的放射免疫研究。通过对造模结束后各组大鼠HPA轴上各项指标的放射免疫检测,观察模型大鼠HPA轴的变化情况,并探讨逍遥散的重要调节作用。 实验一：将54只大鼠随机分为3组：正常组、模型组和逍遥散组。每天3h束缚造模,共21天。通过三方面对此模型评价：①对大鼠宏观表征、进食量、进水量、体重增长量及反映小肠吸收功能的血清D-木糖含量检测；②对大鼠旷场实验进行分析；③以方测证：逍遥散的调节作用。 实验二：将上述三组大鼠在造模第21天的时候处死取材,分别取得各组大鼠的血浆、血清及下丘脑组织匀浆,进行放射免疫检测,检测指标分别为：血清COR、血浆ACTH、血浆CRH及下丘脑组织匀浆CRH。通过对上述指标的检测,观察各组大鼠HPA轴的变化情况,并探讨逍遥散的调节作用。 3结果和结论 实验一结果：模型组大鼠由初次束缚时反抗不安,逐步转变为神态倦怠,烦躁、毛发枯黄散乱无光泽、大便稀溏等；模型组大鼠体重增长缓慢,食量下降,血清D-木糖含量降低；第7天开始穿格数、站立次数、修饰次数均有下降趋势,第21天达到最低点。而逍遥散对大鼠上述指标有显著的调节作用 结论：利用慢性束缚方法造模,模拟肝郁日久,木郁乘土,肝郁脾虚的病理演变过程,成功复制出大鼠肝郁脾虚证模型 实验二结果：模型组大鼠造模结束时血清COR、血浆ACTH显著升高,血浆及下丘脑中CRH却显著降低。逍遥散组与正常组相比无显著差别。 结论：造模结束时,模型组HPA轴处于腺垂体、肾上腺皮质功能亢进,而负反馈调节导致下丘脑分泌抑制的状态。逍遥散能显著降低COR、ACTH含量,明显增加CRH含量,对HPA轴的改变有显著的调节作用。