康艾注射液对小鼠的放射保护作用及机制的探讨

目的:研究辐射损伤的机制并在此基础上探讨康艾注射液对小鼠的亚急性放射损伤有无保护作用,若有,进一步探讨其保护作用的机理。方法:（1）180只小鼠随机分为0、2和8Gy3个剂量组,三个组分别为20、60、100只。分别用X射线全身照射1次,接受2Gy和8Gy辐射的小鼠再分别分为两组,各为30只和50只。试验组用康艾注射液干预,对照组等量生理盐水,方法相同。于照射后4h、3d和14d,分别抽取小鼠眼球血,用流式细胞仪进行外周血T淋巴细胞亚群CD4+和CD8+的测定。同时活杀小鼠取其胸腺和脾脏,石蜡包埋后,观察光镜及电镜下的变化。另取出新鲜胸腺和脾脏分别研碎,制成细胞悬液,用流式细胞仪测定细胞凋亡率。部分细胞悬液用多聚赖氨酸处理的玻片涂片备免疫组化用,测小鼠胸腺淋巴细胞凋亡相关蛋白Bc1～2蛋白和Bax蛋白的阳性细胞率。（2）实验小鼠共80只,分为4组,每组20只。照射前每组小鼠均取血做白细胞计数。康艾组与辐射对照组均以同一剂量照射一次。照射后康艾组共三组分别进行不同剂量康艾注射液的干预,五天后取血作白细胞计数,同时观察小鼠平均存活时间或30d存活率。辐射对照组用生理盐水平衡。结果:光镜下改变:辐射后小鼠胸腺皮质淋巴细胞急剧下降,第三天降至最低水平,第14天胸腺结构开始恢复。电镜:辐射后4小时小鼠胸腺淋巴细胞出现典型的细胞凋亡的改变。不同剂量的X线照射4h后,胸腺和脾脏细胞的凋亡率即明显升高,三天时达高峰,十四天时略有恢复。外周血淋巴细胞亚群数量改变,其中以CD8+ T细胞对辐射最为敏感,下降幅度最大。康艾药物组与辐射对照组比较,其对接受2Gy和8Gy辐射小组胸腺细胞凋亡率均有明显抑制作用（P＜0.05）。对接受2Gy辐射的小鼠,Bc1-2蛋白的表达和Bax蛋白的表达辐射24h和第3天时康艾注射液组与辐射对照组比较（P＜0.05）有差别。康艾注射液对接受2Gy辐射的小鼠,可以促进Bc1-2蛋白的表达,抑制Bax蛋白的表达;辐射第14天时,辐射对照组与康艾注射液组比较（P＞0.05）,Bc1-2和Bax蛋白的表达趋于接近。对接受8Gy辐射小鼠,辐射24h、3d、14d后康艾注射液组与辐射对照组比较均为（P＞0.05）,康艾注射液对接受8Gy辐射小鼠Bc1-2蛋白和Bax蛋白的表达,无明显影响。康艾注射液可显著延长受7.5Gy照射小鼠平均存活时间,提高30d存活率和白细胞数。康艾药物组与辐射对照组比较,受照射小鼠WBC明显升高（P＜0.05）。结论:康艾注射液能明显抑制接受2Gy辐射的小鼠和8Gy辐射小鼠的胸腺、脾脏细胞凋亡率。康艾注射液对接受2Gy辐射的小鼠,辐射24h和第3天时可以促进Bc1-2蛋白的表达,抑制Bax蛋白的表达。辐射第14天时这种作用不显著。康艾注射液对接受8Gy辐射的小鼠,辐射24h、3d、14d后Bc1-2蛋白和Bax蛋白的表达无明显影响。康艾注射液抑制细胞凋亡率是通过促进Bc1-2蛋白的表达,抑制Bax蛋白的表达来调控的。康艾注射液对接受辐射的小鼠免疫功能有一定的保护作用。康艾注射液对小鼠具有放射保护作用。