促红细胞生成素（EPO）对大鼠脑缺血保护作用及机制的实验研究

第一部分： 目的： 1、在大鼠脑缺血再灌注模型中，探讨EPO预处理对海马CA1区Bcl-x1蛋白表达的影响。 2、在大鼠脑缺血再灌注模型中，探讨EPO预处理对海马CA1区细胞线粒体CytC向胞浆释放的影响。 方法： 利用4-VO法制作短暂性全脑缺血模型，选用纯种健康雄性SD大鼠22只，随机分3组：1、假手术组(n=6)。2、生理盐水组(n=8)，闭塞双侧颈总动脉前3小时，脑室注射生理盐水，全脑缺血15分钟后恢复血流。3、EPO组(n=8)，闭塞双侧颈总动脉前3小时，脑室注射rHuEPO，全脑缺血15分钟后恢复血流。在脑缺血再灌注后24小时断头，取海马组织用作Bcl-x1蛋白及CytC免疫组化检测，分别计数各组海马CA1区Bcl-x1蛋白及CytC阳性细胞数。 结果： 全脑缺血再灌注24h，生理盐水组海马CA1区Bcl-x1免疫反应阳性细胞较假手术组明显降低(P＜0.01)；EPO组海马CA1区Bcl-x1免疫反应阳性细胞明显多于生理盐水组(P＜0.01)。生理盐水组海马CA1区CytC免疫反应阳性细胞数较假手术组明显降低(P＜0.01)；EPO组海马CA1区CytC免疫反应阳性细胞数明显多于生理盐水组(P＜0.01)。 结论： 1、EPO预处理可以促进缺血后大鼠海马CA1区Bcl-x1蛋白表达。 2、EPO预处理可以抑制缺血后大鼠海马CA1区CytC从线粒体向 胞浆释放。 第二部分: 目的: 1、探讨脑缺血时，EPO预处理对脑的保护机制。 2、在大鼠脑缺血再灌注模型中，探讨EPO预处理对海马CAI区细 胞凋亡的影响。 方法: 利用4一VO法制作短暂性全脑缺血模型，选用健康纯种雄性SD大 鼠22只，随机分3组:1、假手术组(n=6)。2、生理盐水组(n=8)，闭塞 双侧颈总动脉前3小时，脑室注射生理盐水，全脑缺血巧分钟后恢复 血流。3、EPo组(n=8)，闭塞双侧颈总动脉前3小时，脑室注射rHuEPO， 全脑缺血巧分钟后恢复血流。在脑缺血再灌注后72小时，杀死大鼠， 取海马组织依POD法作凋亡细胞检测，计数各组大鼠海马CAI区凋亡 细胞数。 结果: 假手术组海马CAI区未见凋亡细胞:缺血后72小时，生理盐水组 海马CAI区凋亡神经元明显增多，EPO组海马CAI区凋亡神经元较生 理盐水组减少(P<0.01)。 结论: EPO提前给药可以抑制缺血后海马CAI区神经元凋亡。