藏药作为天然高原药物,生长周期短,有效成分含量高,生物活性强,具有很高的药用价值和经济价值。藏茵陈广布青藏高原,为常用传统藏药,味苦,性寒,有清热利湿、平肝利胆的功能,主治急性黄疸型肝炎、胆囊炎、胃炎等症。本论文进行了藏茵陈的化学成分和抗肝细胞损伤的实验研究。
利用常规硅胶柱层析(Silica gel CC),凝胶柱层析(Sephadex LH-20CC)以及制备薄层层析(PTLC),从藏茵陈(Swertia musstii Franch)全草提取物中共分离得到18个化合物。进一步利用1H-NMR、13C-NMR以及2D-NMR(1H-1H COSY, HMQC, HMBC)等现代波谱技术,结合文献对比鉴定了18个化合物的结构。
从藏茵陈全草的浸膏中得到了18个化合物,其中5个(?)酮类化合物:1,3-二羟基-6,7-二甲氧基(?)酮(1),雏菊叶龙胆酮(2),1,3,8-三羟基-5-甲氧基(?)酮(3),1,3,7-三羟基(?)酮(4),1,3,5,8-四羟基(?)酮(5);2个(?)酮苷类化合物:8-O-β-D-吡喃葡萄糖-1,3,5-三羟基(?)酮(6),芒果苷(7);4个环烯醚萜类化合物:獐牙菜苷(8),獐牙菜苦苷(9),当药苦酯苷(10),amaroswerin(11);3个苯酸类化合物:2,5-二甲氧基-1,4-二羧基苯(12),邻苯三酚(13),没食子酸(14);2个黄酮类化合物:山奈酚(15),杨梅素(16);1个生物碱类化合物:咖啡因(17);1个香豆素类化合物:5,7-二甲氧基香豆素(18)。其中化合物1-6,10-18为首次从该植物中分离得到。
本文还研究了藏茵陈提取物对HL7702肝细胞损伤的保护作用。培养HL7702型肝细胞,采用CCl4体外诱导肝细胞损伤,检测培养上清液中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和乳糖脱氢酶(LDH)的活性水平,测定上清液中丙二醛(MDA)的含量,并用MTT法检测细胞存活率。实验结果表明,藏茵陈提取物(10μg/ml、1μg/ml、10-1μg/ml、10-2μg/ml)剂量组可明显降低由CCl4诱导的损伤肝细胞培养上清液中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和乳糖脱氢酶(LDH)的活性水平和丙二醛(MDA)的含量水平,显著提高CCl4诱导损伤肝细胞的存活率。实验结果提示藏茵陈提取物对HL7702肝细胞损伤有直接保护作用。