牡丹离体快繁技术的研究

牡丹的组培快繁技术存在着增殖倍数低、生根困难和移栽成活率低等问题,难以应用于生产。本研究从无菌培养体系建立、增殖培养体系的建立、多胺生根诱导培养、生根苗休眠解除和生根苗驯化移栽等方面入手,建立了一套成熟的牡丹组培快繁体系,具体结果包括： 1.无菌培养体系的建立：不同灭菌剂对牡丹外植体灭菌效果不同,对‘乌龙捧盛’而言,0.1%升汞的灭菌8或10min效果最佳,存活率为100%。2%NaClO和1／10的84消毒液都能达到一定的灭菌效果,外植体玻璃化发生率较高,导致有效存活率降低。 2.增殖培养体系的建立：以改良WPM为基本培养基,在BAP浓度0.5mg·L-1与GA30.2 mg·L-1,并附加AgNO3 2 mg·L-1的组合中,牡丹4个品种的组培苗增殖倍数较高且生长健壮。随着继代次数的增加,‘正午’增殖倍数表现较稳定,平均为5.43,且玻璃化程度较低；‘乌龙捧盛’、‘锦袍红’和‘迎日红’随着继代次数的增加,玻璃化率提高,增殖倍数逐渐降低,平均增殖倍数分别为2.97,3.2,4.03。 3.组培苗生根：在正午’试管苗生根中加入腐胺、精胺和亚精胺均可以促进试管苗的生根,使生根率、根数和根长有明显的提高。不同的多胺种类有相同的最适浓度和相似的最佳诱导时间,超过这个范围生根率和生根质量下降。腐胺的最佳诱导组合为1mg·L-1处理30天,生根率高达80.56%,平均根数达4.35条；精胺的最佳浓度和时间处理组合为1mg·L-1诱导25天,生根率为46.36%,平均根数为2.14条；亚精胺的最适作用组合为1mg·L-1处理30天,生根率为生根率为58.33%,平均根长为3.89cm。试验对三种多胺处理进行比较发现腐胺的诱导效果优于其他两种多胺。 4.组培苗的休眠解除与驯化移栽：4℃低温处理30天即可解除‘正午’生根组培苗的休眠现象,低温处理后,生根苗的叶片数、茎高、株高、不定根长度等指标都有所增加。休眠解除期间,以珍珠岩：蛭石(1：1)的培养基支持体对组培苗的生长、提高移栽成活率有一定的作用。驯化移栽时期以冬春季为佳,在移栽过程中质量分级为一级、二级的组培苗移栽成活率较高,根茎协调性好。