枳菊解郁汤对抑郁模型小鼠的抗抑郁作用及其神经机制

研究目的:本研究利用多种因素、慢性、不可预知性的应激方式(CUMS)建立抑郁动物模型。在研究中,测定各组小鼠的体重、开场行为、蔗糖消耗、悬尾实验等行为学变化,空间学习记忆能力的变化,检测脑内海马各区及前脑皮层神经元形态学变化以及基质细胞衍生因子(SDF-1)表达情况的变化。分别通过分子生物学、行为学、神经生物学等方面探讨枳菊解郁汤的抗抑郁作用及其相关的神经机制。研究方法:按随机分组方式,把青年小鼠分为对照组、抑郁模型组、氟西汀组(阳性药物组)、枳菊解郁汤组(低剂量组、中剂量组、高剂量组),共6组。抑郁动物模型根据CUMS应激方式建立,对照组、抑郁模型组小鼠每天各进行蒸馏水灌胃;氟西汀组小鼠进行氟西汀灌胃;枳菊解郁汤三种剂量组小鼠分别进行低、中、高剂量中药灌胃。21天慢性应激期间选取不同时间段,测量6组小鼠不同时间的体重;CUMS应激结束后利用开场实验、悬尾实验、Morris水迷宫实验,分别检测小鼠自发行为、探究活动、绝望情绪及空间学习记忆的变化;慢性应激开始前、后利用蔗糖消耗实验检测各组小鼠快感缺失的变化;利用HE染色法及免疫组化学法观察小鼠海马各区及前脑皮层区域神经元的细胞形态学变化并测定SDF-1的表达变化。研究结果:1、体重变化:相比于对照组,抑郁模型组小鼠体重应激期间增长缓慢,应激结束后体重显著降低;相比于抑郁模型组,氟西汀组、枳菊解郁汤各剂量组小鼠体重均明显增加,且出现显著性差异。2、开场实验:相比于对照组,抑郁模型组小鼠在新异环境下的探究行为、自发活动明显减少,紧张度显著增加;相比于抑郁模型组,氟西汀组和中药各剂量组的开场行为出现明显变化,其中氟西汀组和中剂量组的探究行为、自发活动显著增加,紧张度显著下降。3、悬尾实验:相比于对照组小鼠,抑郁模型组小鼠的第一次静止不动时间和累计不动时间均显著增加,其绝望程度显著增加;相比于抑郁模型组小鼠,氟西汀组和枳菊解郁汤中、高剂量组小鼠的第一次静止不动时间及累计不动时间均显著减少,小鼠绝望程度降低。4、蔗糖消耗实验:应激前各组小鼠蔗糖消耗度无显著性差异。应激后,相比于对照组,抑郁模型组小鼠蔗糖消耗度显著降低;相比于抑郁模型组,氟西汀组、枳菊解郁汤各剂量组小鼠的蔗糖消耗度均有不同程度的增加,快感缺失程度降低。5、Morris水迷宫实验:相比于对照组,抑郁模型组小鼠在定位航行实验中的逃避潜伏期明显增加,游泳总路程明显延长;空间搜索实验中在目标象限停留时间明显缩短,经过平台次数减少。相比于抑郁模型组,氟西汀组、枳菊解郁汤各剂量组在定位航行实验中的逃避潜伏期出现明显缩短的现象,游泳总路程明显减少;空间搜索实验中在目标象限停留的时间明显增加,经过平台次数增多,学习记忆能力增强。6、HE染色:抑郁模型组小鼠海马各区和前脑皮层神经元出现细胞核萎缩,细胞排列疏松、不整齐,出现细胞凋亡现象及变形细胞,细胞数量减少,染色较浅、着色不匀。氟西汀组和中药各剂量组(特别是中剂量组)小鼠海马各区神经元细胞排列整齐,无变形细胞与细胞萎缩现象,层次清晰,前脑皮层神经元染色清晰,细胞完整无变形。7、SDF-1免疫组化:相比于对照组,抑郁模型组小鼠各脑区SDF-1的阳性细胞数减少、平均目标灰度值显著增加,SDF-1表达减弱;氟西汀组、中药各剂量组脑内SDF-1的阳性细胞数增加、平均目标灰度值降低,SDF-1表达增强。结论:1、抑郁模型小鼠出现体重减轻、自发探究行为降低、绝望程度增加、快感缺失增强等行为学改变,中药复方枳菊解郁汤可改善由应激导致的抑郁模型小鼠行为学的变化,起到一定的抗抑郁作用。2、抑郁模型小鼠出现空间学习记忆能力的减弱,中药复方枳菊解郁汤能够增强抑郁模型小鼠的空间学习记忆能力。3、抑郁模型小鼠海马各区及前脑皮层出现不同程度的损伤、SDF-1表达减弱,中药复方枳菊解郁汤能够降低损伤程度,起到一定的抗抑郁作用;其机制可能是通过上调SDF-1的表达,降低对各脑区神经元的损伤。