罗布麻叶多年来一直为《中国药典》的收载品种,中医文献记载其有清热平肝、养心安神、利尿消肿和去痰作用。在我国东北地区和日本,罗布麻叶作为茶叶被广泛使用。近年来的药理研究表明,罗布麻叶具有保护肝脏、调节血压、降血脂、抗氧化和抗抑郁作用。本文采用天然药物化学方法,研究罗布麻叶中的黄酮类化学成分。主要研究内容包括:药材品种的生药学鉴定;总黄酮化合物的提取与制备;黄酮类化学成分的分离和纯化;化合物的结构鉴定。
药材来源鉴别:本文通过对药材性状鉴别,叶片与粉末的显微鉴别,理化鉴别和薄层层析鉴别研究,证明本课题所用药材为夹竹桃科罗布麻Apocynum venetum L.的干燥叶。
总黄酮化合物的提取与制备:罗布麻叶水提液上大孔吸附树脂柱,依次用不同浓度乙醇水分别洗脱,合并50%乙醇与70%乙醇洗脱物,减压浓缩,调PH 值,用乙酸乙酯萃取,得总黄酮化合物。
黄酮类化合物的分离纯化:本课题采用两条分离路线同时进行。分别取总黄酮化合物,经聚酰胺和硅胶柱层析进行分离纯化。聚酰胺柱用不同浓度水—乙醇溶液洗脱,所得组分经聚酰胺柱、Sephadex LH-20,反复分离纯化,分别得化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ;硅胶柱用不同比例氯仿甲醇依次洗脱,聚酰胺干柱双向层析分离,Sephadex LH-20 反复分离纯化,分别得化合物Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ。
化合物结构鉴定:本文对所分离的黄酮类单一成分,经熔点测定,理化反应和薄层层析鉴定,红外光谱、核磁氢谱碳谱和质谱解析,已鉴定确定结构的化合物为三叶豆苷、金丝桃苷、槲皮素、乙酰异槲皮苷与异槲皮苷。化合物Ⅳ结构待定,化合物Ⅱ、Ⅵ因量少暂不能进行鉴定。