生命早期营养过剩加重成年期饮食诱导的非酒精性脂肪肝炎

背景：生命早期营养过剩（Chronic postnatal overnutrition，CPO）与机体发生肥胖和成年后胰岛素抵抗（insulin resistance，IR）密切相关，而IR是非酒精性脂肪肝（Non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD）始发的中心环节。NAFLD并非一种独立疾病，它是单纯脂肪变性，非酒精性脂肪性肝炎(Non-alcoholic steatohepatitis, NASH)，肝硬化和肝癌一系列进展性疾病的总称。目前对NAFLD发生发展的机制研究中，经典的“二次打击学说”认为IR是对肝脏的首次打击，但其具体的机制尚未明确。CPO与NAFLD发生及进展的直接关系也尚未见报道。因此，本课题拟通过建立稳定的动物模型探究生命早期营养过剩是否增加成年期胆碱蛋氨酸缺乏饮食（Methionine and choline deficientdiet，MCD）诱导NASH的易感性。 方法：通过调整母鼠喂养子鼠的数量建立早期营养过剩模型，喂养3只子鼠为早期营养过剩组（Chronic postnatal overnutrition, CPO）,喂养10只子鼠为对照组（Control，CTR）,在3周龄断奶后喂养标准饲料。在11周龄时，分别给予标准饮食（Standard chow diet, S）或MCD饮食持续喂养四周,据此将子鼠分为四组：CTR-S, CTR-MCD,CPO-S和CPO-MCD。3周龄、15周龄两个时间点处死子鼠。3周龄时，采用透射电镜技术观察肝细胞超微结构的改变；实时荧光定量PCR检测相关基因的表达；Western Blot检测肝脏中肉碱棕榈酰转移酶-1（Carnitine palmitoyltransferase-1， CPT-1）和细胞色素C（Cytochrome C, Cyt-C）蛋白表达。15周龄时，分别采用H&E染色、油红O染色、F4/80免疫组织化学染色、天狼猩红染色及ɑ-SMA免疫组织化学染色观测肝脏组织形态、脂质沉积、炎症及纤维化程度；全自动生化分析仪检测小鼠血清生化指标的改变情况；实时荧光定量PCR检测相关基因表达；Western blot检测肝组织中固醇调节元件蛋白-1c（Sterol regulatory element-binding protein-1c, SREBP-1c）蛋白表达水平。 结果：与CTR相比，CPO组从第2周龄开始体重增长更为明显并持续至成年期导致成年后IR。在3周龄时，CPO组肝脏组织中SREBP-1c，FAS和SCD-1基因表达明显上调；肝细胞内线粒体出现肿胀，并伴有CTP-1基因及其蛋白表达水平降低，细胞色素C蛋白表达量降低。MCD喂养可导致小鼠肝脏出现典型的NSAH样改变，尤其在MCD-CPO组最为明显，主要表现为：明显的脂质沉积，脂肪变性，大泡样改变，炎性细胞浸润；肝组织TNF-ɑ表达上调；血清ALT及AST水平显著升高。然而肝纤维化程度和TGF-β1mRNA表达各组间无统计学差异。MCD喂养后CPO小鼠肝组织中SREBP-1c, FAS,ACC-1, SCD, MTTP, FABP1, ABCA1和ABCA2基因表达明显下调。 结论：生命早期营养过剩对机体代谢功能可能产生长期负面影响并促进成年期NASH进展。此现象可能与肝细胞脂质外排功能受损和炎症反应加重有关。生命早期营养过剩可能是NASH发展的重要风险因素之一。