铁皮石斛素新成分的分离与功效鉴定

石斛是著名的中药材，具有很高的要用价值，被称为九大仙草之首，自古人们就发现石斛有祛风寒、厚肠胃和补五脏等功效，现代人们多用石斛来治疗喉咙干哑肿痛之症，说明石斛有很好的抗炎效果，近年来，人们对于石斛抗肿瘤方面的关注也越来越多。本文从云南普洱铁皮石斛中提取出一种含量较多的新组分：铁皮石斛素S，并以THP-1分化的巨噬细胞和Jurkat细胞为细胞模型，对此新组分进行了初步的抗炎与抗肿瘤功效的研究，为石斛素S抗炎与抗肿瘤的功效与机理提供了一些实验数据和理论依据。通过ELISA测定石斛素S抗炎效果的实验中我们发现，石斛素S50μg/ml可以显著抑制LPS刺激后巨噬细胞炎症因子TNF-α的分泌，并用RT-PCR证实，IL-6和TNF-α炎症因子的抑制是在mRNA水平上进行的。随后又用Western Blot的方法检测到，其抑制炎症的机理可能与抑制了NF-κB的磷酸化水平有关。本文用流式细胞技术检测不同浓度石斛素S对Jurkat细胞的促死亡效果，并对石斛素S50μg/ml和25μg/ml处理的Jurkat细胞进行了显微摄像，发现石斛素S处理Jurkat细胞半小时后，细胞形态发生变化，细胞的伪足消失，我们因此用Western Blot的方法检测了石斛素S处理Jurkat细胞后，细胞Tubulin蛋白乙酰化水平的变化，发现在石斛素S25μg/ml处理30分钟时，Jurkat细胞Tubulin蛋白乙酰化水平增加，即Tubulin蛋白的稳定性增加。我们也用Western Blot的方法检测了石斛素S25μg/ml处理Jurkat细胞后，细胞PARP蛋白和PUMA蛋白的变化，发现石斛素S浓度为25μg/ml时对Jurkat细胞有促凋亡效果，且这种促死亡机制可能不是由p53信号通路主导的。