脾气虚证唾液代谢组学的初步研究

研究目的：本研究以中医理论“脾在液为涎”为突破口，以脾气虚证作为切入点，从唾液代谢组学角度探讨“脾气虚证”的科学内涵，且有望在脾气虚证辅助诊断的生物标志物方面有新的发现。 研究方法：采用病证结合的方法，选择慢性胃炎、消化性溃疡病等脾气虚证患者为实验组，以正常人作为正常对照组，以慢性胃炎、消化性溃疡病等湿热蕴脾证患者为实验对照组。采用标准化的动态全唾液收集方法，唾液收集时间为上午9：30～10：30，受试者在安静房间，收集动态唾液，受试者咀嚼2g胶母5min，再将此期间分泌的唾液外吐于无菌痰杯内。收集的唾液在4℃下14000转／g离心20min，取上清分装后，立即检测或于—70℃保存待用。运用pH仪测定唾液的pH值，应用全自动生化分析仪测定唾液中的生化指标，应用核磁共振（NMR）等方法测定唾液的1H NMR谱，并将其积分值进行中心化和比例换算，用Simca-P 10.0软件进行主成分分析（PCA），以研究脾气虚证唾液的代谢特征。 研究结果：（1）与正常对照组比较，脾气虚证组唾液的pH值及生化指标中钾（K）和氯（Cl）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、白球比值（ALB／GLB）、肌酐（Crea）、尿酸（UA）、乳酸脱氢酶（LDH）、磷酸肌酸激酶（CK）、葡萄糖（GLU）和甘油三脂（TG）的含量无统计学意义（P＞0.05）。脾气虚证组唾液中钙（Ca）、镁（Mg）、磷（P）和尿素氮（BUN）的含量均明显高于正常对照组（P＜0.05），而唾液中钠（Na）的含量明显低于正常对照组（P＜0.05）。湿热蕴脾组唾液中镁（Mg）、磷（P）、谷草转氨酶（AST）和甘油三脂（TG）的含量明显高于正常对照组（P＜0.05），其中TG的含量也明显高于脾气虚证组（P＜0.05）。 （2）实验各组唾液的典型1H NMR谱的主成分积分值集中分布于椭圆形散点图（95％置信区内）的3个区域，脾气虚证组、湿热蕴脾组与正常对照组无明显交叉和重叠；湿热蕴脾组集中分布在左方，脾气虚证组集中在右上方，而正常对照组集中分布在右下方。进一步对1H NMR谱变化值影响较大的两个主成分PC1和PC2的分析表明，与正常对照组相比，脾气虚证组唾液中则乳酸（1.34 ppm）、N-乙酰糖蛋白（2.1 ppm）、乙醇（1.18 ppm）等物质含量相对较高，而湿热蕴脾组唾液中主要是醋酸盐（1.9 ppm，1.94 ppm）、丙酸盐（1.06 ppm）、丙氨酸（3.78 ppm）含量相对较高。这提示脾气虚证、湿热蕴脾、正常人等三组之间唾液中的代谢网络存在明显的差异。 研究结论：脾气虚证唾液的代谢谱明显偏离正常人群，提示“脾在液为涎”的中医理论具有科学性。