胡柚果肉平衡血糖组分的初步筛选

胡柚是我国特有的一种柑橘品种,含糖量较高,研究表明胡柚果肉具有平衡血糖的功能,但具体成分不明确。本论文将胡柚果肉分离成不同极性的5个组分(石油醚组分、二氯甲烷组分、乙酸乙酯组分、正丁醇组分和水组分),测定5个组分中的主要物质及其含量。通过3T3-L1脂肪细胞模型筛选平衡血糖组分,并采用小鼠模型对胡柚果肉中的5个组分进行正常小鼠急性毒性的研究,为进一步糖尿病模型筛选平衡血糖组分提供参考,最后通过糖尿病模型筛选平衡血糖的组分。研究结果如下： 5个组分中,水组分的含量最高,约占乙醇提起物的88.96±2.34%。黄酮类化合物主要分布在乙酸乙酯组分中,其余的分布在二氯甲烷组分和正丁醇组分中,其中橙皮苷和柚皮苷的含量为1.59±0.25mg/g和3.74±0.38mg/g。柠檬苦素类化合物主要存在于二氯甲烷组分中,其次是乙酸乙酯组分和石油醚组分,柠檬苦素类化合物主要为柠檬苦素和诺米林。类胡萝卜素大多数存在于石油醚组分中,其余存在于二氯甲烷组分中。糖类物质在提取物中含量最高,主要存在于水组分中,少量的糖类存在于正丁醇组分中。 利用3T3-L1脂肪细胞模型筛选胡柚果肉中平衡血糖的组分。以胡柚果肉的乙醇提取物为实验材料,发现其可促进3T3-L1脂肪细胞对葡萄糖的摄取,但当浓度达到40mg/L时,其作用效果会随着浓度的升高而降低。将胡柚果肉乙醇提取物用不同极性的溶剂进行分离,以不同极性的各组分作为实验材料,通过3T3-L1脂肪细胞筛选模型发现3T3-L1脂肪细胞在胡柚果肉5个组分中的4个组分(石油醚组分、二氯甲烷组分、乙酸乙酯组分和水组分)的作用下可高效地摄取周围环境中的葡萄糖。当浓度为0-50mg/L时,石油醚组分和水组分促进3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取的效果随着浓度的提高而增加；当浓度达到50mg/L时,作用效果达到最高,且水组分的作用效果高于石油醚组分；当浓度为50～100mg/L时,石油醚组分和水组分促进3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取的效果随着浓度的升高而降低。二氯甲烷组分和乙酸乙酯组分在浓度为0-100mg/L时,促进3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取的效果随着浓度的升高而增加。而正丁醇组分只有当浓度为30mg/L时促进3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取的效果显著。各组分间的相互作用结果显示,在一定浓度下时,各组分联合作用的效果普遍低于它们单独作用效果之和。 通过正常小鼠模型进行胡柚果肉5个组分(石油醚组分、二氯甲烷组分、乙酸乙酯组分、正丁醇组分和水组分)的急性毒性实验,在给药量为2.4g/kg时,小鼠未见明显毒性反应及死亡情况,且体重增加与正常对照组比较无显著差异,小鼠的一般行为、运动功能与正常对照组小鼠无异,呼吸、被毛、肤色以及眼耳均正常,排尿等也无异常现象,表明在此剂量下胡柚果肉中各组分对正常小鼠正常生长无影响,判断当实验浓度低于此浓度时,胡柚果肉5个极性组分对正常小鼠生长无影响,可进行糖尿病小鼠筛选平衡血糖组分的实验。 通过糖尿病小鼠模型筛选平衡血糖的组分。在给药期间,各组小鼠体重平稳增加。将胡柚果肉分离成不同极性的5个组分(石油醚组分、二氯甲烷组分、乙酸乙酯组分、正丁醇组分和水组分),发现给药4周后,水组分高剂量组与糖尿病模型对照组比较,降低糖尿病小鼠血糖呈显著性(p<0.05)。 通过本研究,得出胡柚果肉中存在有效成分(黄酮类化合物、柠檬苦素类化合物、类胡萝卜素),其中5个组分可有效地促进3T3-L1脂肪细胞对葡萄糖的摄取。水组分高剂量组可显著降低糖尿病小鼠血糖,与糖尿病模型对照组比较呈显著性(p<0.05)。该研究可以为胡柚果肉中平衡血糖成分的筛选提供参考。