慢传输性便秘(slow transit constipation,STC)是较常见的一类功能性顽固性便秘,发病机制不清,保守治疗对STC效果有限,严重者最终只有手术切除全(次全)结肠。近年来的研究证实Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)是介于肠神经系统和平滑肌细胞之间的一类极其特殊的间质细胞,是胃肠道慢波的起搏细胞,对肠神经信号传递到平滑肌起重要的调控作用,探索ICC的病理变化可望成为STC发病机制研究的突破点。c-kit是ICC的特异性标志物,属受体酪氨酸激酶家族第三亚类,与其配体干细胞因子(stem cell factor,SCF)结合后所启动的信号通路,对ICC的发育、分化及表型维持至关重要。用中和抗体阻断c-kit与SCF结合可导致ICC数目减少,肠道慢波消失。c-kit基因失功能性突变(loss of function mutation)也可导致ICC缺失。国外有少量初步的研究发现STC患者结肠ICC明显减少,但ICC减少的原因和机制并不清楚,国内尚未见到类似的报道。那么,STC患者结肠ICC的形态和分布究竟发生了怎样的变化?这种异常改变是否与c-kit、SCF基因异常表达或者失功能性突变有关?迄今国内外未见报道。
目的:
1.研究STC患者乙状结肠ICC的分布、形态和数量变化,探讨STC结肠ICC形态和数量异常变化与细胞变性、凋亡、坏死是否有关。从转录和翻译水平探讨c-kit、SCF基因表达在STC结肠ICC异常变化中的作用。
2.初步检测STC患者c-kit基因第9～21外显子及部分相邻的内含子基因序列变异(突变)情况,检测SCF因第54号氨基酸多态位点在STC患者中的变化,为今后大规模的分子流行病学调查奠定基础。
方法:
收集我院1995年以来手术治疗的STC患者17例(基因测序部分包括了近期的6例,为23例),在常规光镜检查的基础上,采用免疫组织化学方法观察乙状结肠ICC的分布和形态变化;进一步采用免疫荧光染色结合激光共聚焦显微镜技术分析ICC的数量
